【摘 要】
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在哺乳动物胚胎发生过程中滋养层细胞的分化是首次分化事件,对胎盘的形态和生理起着重要作用.利用含有两个小分子抑制剂的培养系统，成功地从牛体外受精囊胚获得牛滋养层干细胞样细胞.这些细胞可以在添加B27,N2,Glutamax和2inhibitors(PD0325901,CHIR99021)的DMEM/F12和NeuralBasal培养液的培养体系中连续增殖,形成圆顶形囊泡结构,碱性磷酸酶染色呈阳性,表
【机 构】
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内蒙古自治区,呼和浩特市,玉泉区昭君路24号,内蒙古大学实验动物研究中心,010070
【出 处】
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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会
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在哺乳动物胚胎发生过程中滋养层细胞的分化是首次分化事件,对胎盘的形态和生理起着重要作用.利用含有两个小分子抑制剂的培养系统，成功地从牛体外受精囊胚获得牛滋养层干细胞样细胞.这些细胞可以在添加B27,N2,Glutamax和2inhibitors(PD0325901,CHIR99021)的DMEM/F12和NeuralBasal培养液的培养体系中连续增殖,形成圆顶形囊泡结构,碱性磷酸酶染色呈阳性,表达OCT4,SOX2,NANOG,CDX2,CK18,SSEA-1,SSEA-4,TRA-1-60和TRA-1-81等胚胎干细胞和滋养层干细胞标志因子,注射到NonScid小鼠体内可以形成包含外胚层,中胚层和成熟滋养层细胞的畸胎瘤.基因表达谱芯片分析显示,这些细胞表达滋养层干细胞和滋养层细胞标记基因如,ETS2,ELF5,SMARCA4,HSD17B1,CYP11A1,PPARG,Id2,GCM1,HAND1和THAP11.但是典型的多能基因如OCT4,SOX2和NANOG表现明显的下调,而滋养层干细胞标志基因CDX2等表现明显的上调.
其他文献
本研究利用RNAi技术对小鼠生精细胞中ZfX基因进行沉默，旨在产生更多的雄性后代，为控制动物性别寻找新的方法。研究表明：pqz3和pqz4两个干扰表达载体对zfx基因的沉默效果较好，体外实验和体内实验结果一致。干扰zfx基因可以使X精子受损，为Y精子创造了更多的受精机会从而产生了更多的雄性后代小鼠，说明zfx基因在X精子的发生发育过程中有着重要作用。但具体的功能还需要进一步的研究。
Growth hormone is a positive regulator of mammary gland development.Dairy animals that are administered growth hormone display enhanced lactation performance, a desirable agricultural trait.The object
在北京鸭中发现了一种序列与轻链基因很相似,但是胚系VJ片段已经重组并且表达不发生突变的基因.因为这种基因的结构与表达特点与以往发现的所有免疫球蛋白轻链类型都不相同,按照DNA-RNA-蛋白水平的顺序逐步阐明这种基因的特点,并最终解释其功能.通过研究,已经清楚了这种基因的基因结构和不同时期的组织表达特异性,但是针对目的蛋白的特异性单抗一直没有制备成功,蛋白和细胞水平的研究还无法进行.
目的：从绵羊外周血中分离提取游离的DNA(cfDNA).方法：采集绵羊血液分离出血浆,用酚氯仿法抽提游离的DNA.PCR扩增Y染色体性别决定区基因(SRY).结果：提取的6只绵羊cfDNA样本,有5只公羊样本均检测到127bp的目的条带.结论：绵羊外周血中存在游离DNA,可以应用于SRY基因片段的检测.
本文以绵羊为研究对象，采用quantitative RT PCR方法，对有无第一极体、有无卵丘细胞及经BCB阴性、阳性的绵羊卵母细胞中母源基因mRNA的表达量进行了研究，认为GDF9,Zarl和Mater基因表达量可以作为判断绵羊卵母细胞的分子指标。
本研究采用分离着床前囊胚的内细胞团的方法培养黄牛类胚胎干细胞,通过对分离胚胎内细胞团方法和控制饲养层密度以及传代方法的培养条件的实验摸索,得出以下结论:使用器械分离法分离出囊胚内细胞团,使其贴壁在密度为80％的饲养层生长,传代培养时控制饲养层密度为40％,将器械传代法与酶消化传代方法结合进行传代能够较好的获得黄牛类胚胎干细胞.通过以上方法培养的第5代的黄牛类胚胎干细胞,具有典型的胚胎干细胞形态,经