【摘 要】
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本文将含有一段HEVORF2基因片段和HEVORF3全基因的表达质粒pHEV23导入大肠杆菌BL-21中,IPTG诱导表达蛋白.表达蛋白经Ni2+-NTA树脂亲和纯化,SDS-PAGE和Western-blot鉴定后,纯
【机 构】
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浙江省医学科学院生物工程研究所,浙江,杭州,310013
【出 处】
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2005年全国生化与生物技术药物学术年会
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本文将含有一段HEVORF2基因片段和HEVORF3全基因的表达质粒pHEV23导入大肠杆菌BL-21中,IPTG诱导表达蛋白.表达蛋白经Ni2+-NTA树脂亲和纯化,SDS-PAGE和Western-blot鉴定后,纯化蛋白免疫小鼠,用ELISA检测小鼠血清IgG抗体,T细胞增殖反应检测细胞免疫应答.结果表明:表达蛋白的分子量为55kD,纯度可达90﹪以上;表达蛋白能与患者阳性血清呈特异反应;表达蛋白能诱导Blab/c小鼠产生HEV特异性抗体反应和T细胞增殖反应.该研究表明嵌合重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,从而为进一步研究开发HEV诊断试剂盒及基因工程疫苗提供了基础.
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