【摘 要】
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本试验以自行制备的壳聚糖铜(CS-Cu)为试验材料,运用Caco-2细胞模型探讨CS-Cu的吸收转运机理,为其作为新型有机铜源添加剂在生产中的应用提供科学依据.试验首先建立Caco-
【机 构】
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浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室,饲料科学研究所,杭州310029
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会
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本试验以自行制备的壳聚糖铜(CS-Cu)为试验材料,运用Caco-2细胞模型探讨CS-Cu的吸收转运机理,为其作为新型有机铜源添加剂在生产中的应用提供科学依据.试验首先建立Caco-2细胞模型,Caco-2细胞在培养21天后,形成紧密连接的单层,跨上皮细胞电阻达到一个相对恒定的值;标志性漏出物荧光素钠在210min内总透过率为2.39%;刷状缘标志性酶结果显示肠腔侧碱性磷酸酶活性显著高于基底侧酶活性,此时Caco-2细胞模型符合公认的小肠上皮吸收模型标准;然后将培养21天通过完整性评估的Caco-2细胞模型进行转运和摄取试验.结果表明:CS-Cu和CuSO4在AP→BL和BL→AP的跨膜转运和摄取过程中,转运量和摄取量呈浓度和时间(除浓度外,其他条件下只研究了AP→BL的转运和摄取)依赖性增加,其中CuSO4组的转运量和摄取量显著高于CS-Cu组(P<0.05),但在浓度增至15μmol/L时,CS-Cu在细胞中的摄取量呈饱和趋势;在4℃孵育条件下,CSCu和CuSQ在AP→BL的转运量和摄取量与37℃时相比显著降低(P<0.05),与CuSO4组相比,CSCu组的转运量和摄取量有升高趋势.Caco-2细胞对CS与CuSO4混合物的转运和摄取显著低于CSCu和Cu-SO4 (P <0.05).本试验结果提示,CS-Cu在Caco-2细胞中的吸收可能是主动吸收和跨细胞途径的被动吸收同时进行的过程,而且细胞对CS-Cu的转运量和摄取量显著高于CS与CuSO4混合物.
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