【摘 要】
：
[目的]在课题组前期研究已证实黏菌素可诱导大鼠PC12细胞(交感神经细胞系)发生自噬和凋亡的基础上,进一步探讨p53蛋白对黏菌素诱导PC12细胞发生的自噬和凋亡是否存在调节
【机 构】
：
辽宁医学院畜牧兽医学院,锦州,辽宁,121001
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨
论文部分内容阅读
[目的]在课题组前期研究已证实黏菌素可诱导大鼠PC12细胞(交感神经细胞系)发生自噬和凋亡的基础上,进一步探讨p53蛋白对黏菌素诱导PC12细胞发生的自噬和凋亡是否存在调节作用及相关机制.[方法]将培养好的PC12细胞分为空白组、黏菌素组(125 μg·mL-1)、PFT-α组(p53抑制剂,20 nM)及黏菌素(125 μg.mL-1)与PFT-α(20 nM)联合用药组.各组细胞在培养箱内分别与药物接触12h和24 h.运用透射电镜、LC3免疫荧光染色、Hoechst 33258荧光染色、real-time PCR和western blotting方法观察细胞自噬和凋亡并检测p53通路上关键因子的表达.[结果]125 μg·mL-1黏菌素可诱导PC12细胞发生自噬和凋亡,且可使细胞中LC3-Ⅱ、p53、DRAM(损伤相关自噬调节因子)、PUMA(p53上调促凋亡蛋白)、AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)和caspase-3的基因水平和蛋白表达量有所增加,使mTOR(雷帕霉素靶蛋白)的基因水平和蛋白表达量有所降低.重要的是黏菌素在12 h时主要诱发细胞自噬,并显著性增加胞核内p53的表达量；在24h时主要诱发细胞凋亡,并显著性增加胞浆中p53的表达量.PFT-α (20 nM)可明显抑制细胞内p53活性,且使细胞活性随其剂量增加而有所下降.在黏菌素与PFT-α联合作用时,PFT-α可抑制黏菌素诱导的细胞自噬并促进其诱导的细胞凋亡.[结论]黏菌素诱导的细胞自噬和凋亡与p53的调控网络有关,且其诱导细胞自噬或凋亡的趋势可能与p53在细胞内的定位调节有关.
其他文献
[目的]建立一种基于四环素受体蛋白TetR以及DNA序列tetO的四环素类药物残留检测的ELISA方法.[方法]以大肠杆菌XL1-Blue为模版,克隆TetR基因后,在大肠杆菌中诱导表达并进
对细菌耐药基因的检测是监测耐药菌/耐药基因分布的重要课题任务，针对单独依靠传统实验室PCR检测技术的局限性，高通量基因芯片检测广泛应用于耐药基因的检测领域。针对细菌
The susceptibility breakpoints are crucial for prudent use of antimicrobials.This study has firstly developed a susceptibility breakpoint (MIC≤0.25 μg/mL)
试验旨在通过开展对禽源多重耐药印第安纳沙门氏菌基因组上多重耐区基因序列的对比分析，探讨耐药基因可能的来源及传播途径。试验采用Southern blot技术对与菌株耐药表型
研究目的：为了解新疆克拉玛依和昌吉地区春秋两季猪源大肠杆菌携带β-内酰胺酶和/或16S rRNA甲基化酶基因及其共存情况.方法：通过PCR方法对克拉玛依地区春季样142株、克拉
内蒙古是我国主要的畜牧业生产基地之一，但奶牛养殖业中常见的奶牛乳房炎和子宫内膜炎的发生能降低奶牛产奶量和牛奶品质，严重影响畜牧业的经济发展.牛源链球菌是引发奶牛
为了探索cpxR基因对鼠伤寒沙门菌多重耐药性(Multidrug resistance,MDR)的调控机制,同时避免外排泵acrB的存在掩盖cpxR对其他外排泵或外膜蛋白的调控作用.本研究利用基于
(目的)本研究旨在分析猪链球菌的基本遗传特征,鉴定介导多重耐药猪链球菌的可转移遗传元件,为研究其水平转移规律和进化路径提供参考.(方法)通过对临床分离的猪链球菌进
[目的]通过沙咪珠利的小鼠精子畸形和骨髓微核，检测受试品的遗传毒性，为沙咪珠利的进一步开发利用奠定基础.[方法]①小鼠精子畸形试验：60只清洁级昆明小鼠随机分为五组，每组1
[目的]米尔贝肟吡喹酮片为一种猫用新型复方驱虫药,临床用于驱除猫体内蠕虫,内服,一次量,每1kg体重猫2～4mg(以米尔贝肟计)。本试验旨在了解在推荐应用条件下米尔贝肟吡喹