【摘 要】
：
根据已发表的人、小鼠、地鼠、奶牛、野兔、猪、猩猩、绵羊动物的C3d基因同鸡的C3α链进行序列比较分析,发现在鸡的C3α链上有一段约897bp序列同上述动物有较高的同源性,在上下端保守区域设计一对引物788bp,应用RT-PCR扩增鸡C3d部分基因,并克隆到pMD18-T载体,测序正确后再在上下端分别设计一对引物,理论长度为378bp和336bp,最后用三种PCR产物延伸扩出C3d全长.结果成功获得
【机 构】
：
江西农业大学动物科学院,江西,南昌,30045 北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,10089
【出 处】
：
第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会
论文部分内容阅读
根据已发表的人、小鼠、地鼠、奶牛、野兔、猪、猩猩、绵羊动物的C3d基因同鸡的C3α链进行序列比较分析,发现在鸡的C3α链上有一段约897bp序列同上述动物有较高的同源性,在上下端保守区域设计一对引物788bp,应用RT-PCR扩增鸡C3d部分基因,并克隆到pMD18-T载体,测序正确后再在上下端分别设计一对引物,理论长度为378bp和336bp,最后用三种PCR产物延伸扩出C3d全长.结果成功获得鸡C3d基因重组质粒pMD18-C3d,序列分析表明所获的鸡C3dcDNA全长为993bp,编码331个氨基酸.分析鸡与上述动物C3d核苷酸及其编码的氨基酸同源性分别在66.6﹪,66.2﹪,67.7﹪,66.2﹪,67.1﹪,67.0﹪,59.6﹪,67.1﹪和61.5﹪,61.9﹪,61.2﹪,61.9﹪,56.5﹪,61.9﹪,54.5﹪,61.5﹪,而哺乳动物核苷酸和氨基酸同源性则在74.2﹪-100﹪和72.2﹪-100﹪之间,通过进化树反映出C3d基因具有种的多样性,亲缘关系越近,进化关系也越近.研究的结果表明,鸡C3d与其它动物的C3d在抗原结合位点上没有氨基酸的变化,而与CR2结合的28肽区氨基酸差异明显,说明鸡C3d结合抗原没有专一性,而结合免疫细胞则有种的特异性,由此可以推测鸡C3d只能增强鸡的特异性免疫反应。
其他文献
由于氟喹诺酮类(Fluoroquinlones,FQs)药物的杀菌谱广,可以大量人工合成,结构上具有可塑性,该抗生素在控制人和动物细菌感染中得到了广泛应用.目前其年销售量占抗生素市场总份额的20％左右,仅次于β-内酰胺类抗生素居第二位.氟喹诺酮类药物的广泛应用也导致世界各地不同菌属,如沙门菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肺炎链球菌及金黄色葡萄球菌等均出现了程度不同的耐药性.大肠埃希菌中已知的氟喹诺酮
目前,革兰阳性球菌(包括葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌)的耐药性引起全世界的普遍关注,特别是苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)、万古霉素耐药的肠球菌(VRE)和青霉素耐药的肺炎链球菌(PRSP)的发生率普遍上升,进行多中心的耐药监测,了解这些菌的发生率,将对临床经验用药提供有力的依据.本研究采用中心实验室检测方法,对2005年8月～2005年12月来自我国5个城市(包括北京、上海、杭州、武汉、
细菌耐药性和耐药细菌目前已成为全球性关注的问题,耐药细菌所致感染已构成人类新世纪抗感染治疗的巨大挑战.据目前国内和上海地区的细菌耐药性监测资料显示,耐药细菌的变迁表现在临床上耐药的需氧革兰阳性球菌的感染较前明显增多,革兰阴性杆菌中多重耐药菌株的发生率日趋增多.如革兰阳性球菌中主要表现:(1)耐甲氧西林(苯唑西林)金黄色葡萄球菌的发生率由20世纪70年代中期的5％上升至近年来的63.9％;(2)由凝
梅毒螺旋体抗体的实验室检测最主要的方法为血清学试验.我们分别用不同原理的梅毒螺旋体诊断试剂对43份梅毒螺旋体可疑样品进行检测,并对检测结果进行比较分析.结果表明,梅毒螺旋体抗体免疫印迹试剂(WB)能检出其四种特异性抗体,作为确认试剂有较强的可靠性;梅毒螺旋体抗体诊断试剂酶联免疫双抗原夹心法(ELISA)与梅毒螺旋体抗体诊断试剂凝集法(TPPA)相比有更高的灵敏度;梅毒螺旋体甲苯胺红不加热实验(TR
目的：克隆表达结核分枝杆菌16KD和38KD重组蛋白,测定其抗原性和特异性.方法：利用聚合酶链反应(PCR)自结核分枝杆菌基因组DNA扩增16KD和38KD抗原基因,经测序鉴定后克隆于pGEX4T-2表达载体,转化于大肠杆菌BL21菌株进行诱导表达,利用GSTrapFF蛋白柱纯化表达产物,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其抗原性与特异性.结果：携带重组质粒的菌株经诱导产生高水平的表达产物,纯
目的：对研制的丙型肝炎病毒抗体(双抗原夹心)酶联免疫检测试剂进行临床评价.方法:以克隆表达的HCV多表位嵌合蛋白作为包被抗原,通过多表位嵌合蛋白进行修饰用于标记抗原,研制出HCV双抗原夹心酶联免疫检测试剂;检测血液筛查阴性标本440份,乙肝表面抗原阳性标本90份,HIV抗体阳性标本10份,梅毒螺旋体抗体阳性标本90份及丙型肝炎病毒抗体阳性标本259份.结果:阴性标本440份,10份HIV抗体、90
目的：对研制的丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价.方法：制备抗HCV-核心区(Core)抗原四株单克隆抗体,研制出双抗体夹心检测HCV-core抗原酶联免疫检测(ELISA)试剂.三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份,HBsAg阳性100份,抗HIV阳性40份,从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份.结果：3040份阴性样品检测有3份HCV
目的：验证ELISA法对病毒性疫苗中残余牛血清蛋白检测的适用性.方法：用牛血清蛋白ELISA测定法与牛血清白蛋白ELISA测定法、牛血清IgG-ELISA测定法对麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液、洗涤后病毒收获液以及多种成品疫苗中的残余牛血清蛋白含量进行了测定.结果：麻疹疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗洗涤前病毒培养液中牛血清白蛋白含量依次分别为牛血清IgG含量的70.5倍、65倍、84.
目的：对注册前的HIV抗体快速检测试剂的质量进行评价.方法：用不同的评价试剂检测440份健康献血员样品、300份HIV抗体强阳性样品以及264份HIV感染高危人群样品,并分别计算其特异性和敏感性.结果：17家试剂检测200份HIV抗体强阳性样品的敏感性为100﹪;检测440份健康献血员样品的特异性为97.7﹪～100﹪;检测264份HIV感染高危人群样品的特异性为59.1﹪～100﹪,敏感性为70
目的：了解人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)和丙型肝炎病毒(HCV)核酸联合检测试剂检测的敏感性、特异性以及检测我国不同亚型样品的适应性.方法：用酶联免疫试剂对来自于不同地区的HIV感染者或可疑感染者献血员样品进行HIV抗体和HCV抗体检测,对初次检测HIV抗体阳性者进行抗体确证.用人类免疫缺陷病毒Ⅰ型和丙型肝炎病毒核酸联合检测试剂对样品进行检测,对初次检测阳性者,再用HIVRNA和HCVRNA鉴