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目的:探讨茶多酚对内皮细胞ROS产生和清除酶类基因调控的影响,以阐明茶多酚防治心血管疾病的机制。方法:应用免疫印迹法检测茶多酚对培养细胞内NADPH氧化酶亚基p22phox和p67phox,以及过氧化氢酶,SOD-1蛋白表达水平的变化。用NBT法观察细胞内超氧阴离子(O2-·)的水平。在培养单层细胞中用FITC-dextran(2.5μmol/L)观察漏过荧光量的变化。结果:在BCAECs培养液中加入0.4,4.0μg/ml绿茶或红茶多酚培养24h后,免疫印迹结果显示无论是绿茶多酚还是红茶多酚均使NADPH氧化酶弧基p22phox、p67phox蛋白表达下调,其中,0,4μg/ml的茶多酚使p22phox的表达从100%(对照)分别下调到85%(GTP,p<0.01)和76%(BTV,p<0.05),4.0μg/ml的茶多酚使p22phox的表达从100%(对照)分别下调到53%(GTP,p<0.01)糊51%(BTP,p<0.01)。0.4μg/ml的茶多酚使p67phox蛋白的表达从100%(对照)分别下调到69%(GTP,p<0.05)和63%(BTP,p<0.05)。4.0μg/ml的茶多酚使p67phox的表达从100%(对照)分别下调到46%(GTP,p<0.01)和42%(BTP,p<0.01)。p22phox和p67phox亚基蛋白下调程度和剂量相关。绿茶和红茶多酚均使过氧化氢酶蛋白表达水平升高至对照的200%,其中0.4mg/L的绿茶和红茶茶多酚分别使蛋白表达达到对照的216.8%(GTP)和204.5%(BTP);4.0mg/L的绿茶和红茶茶多酚分别使蛋白表达达到对照的223.1%(GTP)和239.4%(BTP),但未发现这种升高和培养基中茶多酚浓度之间的关系。绿茶茶多酚或红茶茶多酚均明显降低AngⅡ刺激的O2-·的水平(p<0.05),并降低由AngⅢ刺激的透性增加(p<0.05),这种作用可以用NADPH氧化酶抑制剂DPI和抗氧化物Vit E预培养来实现。结论:茶多酚能调节内皮细胞中活性氧族(ROS)产生的关键酶-NADPH氧化酶亚基表达,同时上调过氧化氢酶的表达。我们认为茶多酚主要通过抑制AngⅡ-NADPH氧化酶-O2-·信号途径,降低细胞的渗透性。