论文部分内容阅读
【目的】考察集中不同表面修饰氧化铁纳米颗粒的毒性作用。【方法】首先以人胶质瘤细胞株U87为模型,采用CCK-8法、软琼脂克隆法和流式细胞术来研究不同表面修饰的氧化铁纳米颗粒(iron oxide nanoparticles,IONPs)诱导胶质瘤细胞凋亡的差异。进一步采用自噬抑制剂,研究抑制自噬对U87细胞生长抑制的影响;采用氧化应激抑制剂,研究抑制氧化应激对U87细胞生长抑制的影响;最后利用流式方法结合抑制自噬,抑制氧化应激和诱导自噬后研究三种IONPs诱导U87细胞凋亡的凋控关系。【结果】三种IONPs均可抑制U87的增殖和U87克隆的形成,并呈明显剂量依赖性。当孵育浓度>50μg·mL-1时,U87生长抑制从大到小排序分别为Amine-IONP>PEG-IONP>IONP。在低、中和高剂量,Amine-IONP诱导U87细胞凋亡的能力都显著性高于IONP和PEG-IONP。抑制自噬后,IONP和Amine-IONP在高剂量对U87细胞的生长抑制作用有所降低,PEG-IONP组影响较小;用高内涵实验研究三种IONPs诱导U87细胞产生自噬的特点。三种IONPs均可以诱导U87细胞自噬,且有明显的剂量正相关。抑制氧化应激后,三种IONPs诱导自噬的能力均有所降低,在中、高剂量组Amine-IONP组有显著性差异;加入自噬抑制剂后,低剂量组凋亡率均显著性升高,中剂量组有所降低,高剂量组中Amine-IONP组显著性降低;加入自噬诱导剂后,低剂量组凋亡率均有所降低。中、高剂量组中IONP和Amine-IONP组显著性升高,PEG-IONP组表现各不相同,无显著性差异;加入氧化应激抑制剂后,低剂量组凋亡率均有所升高,IONP和PEG-IONP组显著性增高;中、高剂量组,凋亡率均下降,高剂量中Amine-IONP组有显著性。【结论】IONPs对U87细胞的抑制杀伤作用与其表面修饰密切相关。三种IONPs均可以有效的杀死U87细胞、抑制细胞成瘤以及诱导细胞凋亡。其中,Amine-IONP对细胞杀伤能力最强,PEG-IONP渗透性最好。自噬在IONPs诱导凋亡中以及在Amine-IONP组不同剂量中诱导凋亡体现出了不同的双向调节作用。不同表面修饰的IONPs对诱导U87细胞的凋亡和自噬作用显著,且IONPs诱导的自噬和氧化应激与U87细胞凋亡调控密切相关。该结果为未来不同表面修饰的纳米氧化铁颗粒的毒性风险评价和潜在生物医药应用提供了理论基础。