过表达GATA-4骨髓间充质干细胞通过外泌体修复心肌损伤的探讨

来源 :第19届中国南方国际心血管病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yorehi
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通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠骨髓间充质干细胞构建过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞并加入基因开启剂DOX(强力霉素)而后采用SBI公司的ExoQuick-TC提取分泌的exosome.通过电镜检测提出exosome的形态.经尾静脉注射采用Dir预染的过表达GATA-4-BMSCs分泌的exosome,空载体-BMSCs分泌的exosome,BMSCs细胞分泌的exosome,将不给予任何处理的心梗模型小鼠及正常喂养的小鼠作为对照组.采用心脏彩超检测给予干预措施96小时的心功能改善情况.进而采用小动物活体成像检测心梗局部Dir荧光强度.番茄凝集素评估心梗局部血管生成及采用免疫组化检测心梗局部C-kit阳性细胞的数量.探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)通过分泌外排体(exosome)修复心肌损伤的机制.
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通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠骨髓间充质干细胞构建过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞并加入基因开启剂DOX(强力霉素).而后采用SBI公司的ExoQuick-TC提取分泌的exosome.探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)通过外泌体促进BMSCs向心肌细胞分化能力.
通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠骨髓间充质干细胞构建过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞并加入基因开启剂DOX(强力霉素).将过表达GATA-4BMSCs+DOX,空载体-BMSCs+DOX,BMSCs+DOX用于低氧培养诱导细胞凋亡.同时准备正常条件下培养BMSCs+DOX作为对照组.探讨过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)通过增强干细胞抗凋亡能力提高心梗后心功能
通过慢病毒载体GV308携带GATA-4转染小鼠骨髓间充质干细胞构建过表达GATA-4小鼠骨髓间充质干细胞并加入基因开启剂DOX(强力霉素).各组BMSCs首先用Dil标记,而后将过表达GATA-4-BMSC+DOX与心肌细胞共同培养,空载体-BMSC+DOX与心肌细胞共同培养,BMSC+DOX与心肌细胞共同培养,BMSC单独培养作为对照组,各组培养48小时.采用荧光染色定性检测cTnT、α-ac