液泡分选受体于烟草内多囊泡体的定位研究

来源 :2007两岸三地博士生NBIC学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bianyuantuifei
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  我们早前阐明了液泡分选受体(VSR)主要集中在植物的液泡前体(PVCs)上和烟草BY-2细胞系中作为液泡前体的多囊泡体内。液泡分选受体和BP80报告基因是多囊泡体(MVBs)的标志基因,BP80报告基因的跨膜区域(TMD)和胞液末端(CT)可以特异的将它们带到多囊泡体。拟南芥基因组中含有七个液泡分选受体蛋白,但是它们各自的亚细胞定位和功能还被知之甚少。早期我们假设TMD和CT序列可以正确地将独立的VSR带到其目的地,这里我们基于此假设来研究拟南芥的七个液泡分选受体蛋白(AtVSR1-7)的亚细胞定位。 为此目标,我们发展了七个嵌合载体,其上包括信号肽和紧连的绿色荧光蛋白(GFP)还有各个AtVSR蛋白的TMC/CT序列(sp-GFP-TMD/CT)。在转基因烟草BY-2细胞系里,用激光共聚焦显微镜我们观察到七个sp-GFP-TMD/CT融合子都呈现出经典的点状分布,而且这些点状荧光信号还可以和VSR蛋白有相同定位。此外,渥曼青霉素(Wortmannin)的药物处理使GFP标记的叶泡前的细胞器官呈现出小的囊泡现象,而且这些多囊泡体可以在转基因烟草BY-2细胞系里被VSR的抗体标记。
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