DNA甲基化及甲基化转移酶活性的电化学分析方法

来源 :中国化学会第29届学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xlr9900
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  本文报道一种电化学分析方法用于分析DNA甲基化水平及DNA甲基转移酶活性,该方法通过分析标记在探针DNA分子(S1)上的电化学探针分子的电化学信号而检测DNA的甲基化水平及DNA甲基转移酶活性[1-4].我们以FcA作为电化学探针分子,将其通过酰胺键与固定在电极表面的探针DNA连接;以抑癌基因p53为研究对象,该基因中含Hpa Ⅱ限制性内切酶的作用位点(5-C/CGG-3),该内切酶能剪切未甲基化的双链DNA,剪切后,固定在DNA上的FcA分子则脱离电极,导致电化学响应电流减小;甲基化的DNA则不能被剪切,电化学信号不变化,因此通过比较Hpa Ⅱ限制性内切酶剪切前后FcA的电化学响应电流就能判断DNA的甲基化程度.由于FcA的氧化电位接近0 V(vs.SCE),因而可以避免其他氧化物质的干扰;该方法还能用于分析甲基化酶的活性以及筛选一些抗癌药物.
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