GDNF基因修饰的BMSCs向神经元样细胞分化的体外实验研究

来源 :中国解剖学会2013年年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhouyu2
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探讨维甲酸(RA)和表皮生长因子(EGF)联合诱导胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元样细胞的分化及其可能机制.用GDNF重组腺病毒载体和空病毒质粒(BVP)分别感染大鼠BMSCs,制备GDNF/BMSCs和BVP/BMSCs.
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SCN9A选择性高表达在脊髓背根神经节,编码电压门控钠离子通道Nav1.7的α亚基.在神经病理性痛中Nav1.7的表达及作用尚有争议.本实验体外培养新生大鼠的DRG神经元,经鉴定纯度达到95%,采用免疫荧光双标的方法观察DRG神经元Nav1.7的表达,构建慢病毒载体si-SCN9A RNA转染体外培养的DRG神经元,沉默SCN9A,观察其对Nav1.7表达的抑制情况和膜电位水平的变化.
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为了观察穹窿海马伞切割后不同时间点海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化及定位,本实验行穹窿海马伞切割术,制备模型大鼠.实验分为正常组、切割3、7、14、21、28 d组,分别提取海马组织总mRNA和总蛋白,用Real-Time PCR和Western blot检测大鼠海马组织中RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达;脑冰冻切片进行RUNX1T1免疫荧光检测.
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本课题组近年的研究表明,POU同源盒基因Brn-4在海马神经再生过程中表达增高.为了更好地研究Brn-4在神经再生中的作用,本实验在构建Brn-4过表达载体和干扰载体的基础上,将其转染至体外培养的神经干细胞和新生神经元之中,应用免疫细胞化学技术检测Brn-4在细胞中的表达定位、应用Real-time PCR及Western blot等方法检测Brn-4基因及蛋白的表达,以明确Brn-4在神经元分化
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同源盒基因是生物发育分化的主控基因,其所编码的同源盒蛋白作为转录因子,在神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的增殖、分化过程中起着重要作用.研究认为,作为LIM同源盒基因家族一员的Lhx8,与基底前脑胆碱能神经元的发育与分化有着密切的关系.本实验主要研究Lhx8在海马胆碱能神经再生中的作用.
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The regulation mechanism of iron homeostasis in oligodendrocytes remains unclear.Recently, much research has focused on Ferroportin 1 (FPN1), an iron exporter protein.First of all, about 95% pure prim
会议
为研究Glu对NSCs向神经元分化的影响,分离培养孕15d SD大鼠皮质NSCs,将传至第4代的NSCs行NR1细胞流式分析并以1×105个/ml的密度,接种于置有包被多聚赖氨酸盖玻片的24孔培养板各孔内分化培养,分为Control、Glu、Glu+MK-801(0 h)(0 h加MK-801)、Glu+MK-801(24 h)(24 h加MK-801)组培养1、3、7、14 d后行DCX/Hoe
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人胚胎干细胞(hESC)对于再生医学具有重要的意义,其多能性维持机制是当前科学界普遍关注的焦点.目前认为胚胎干细胞多能性受到染色质表观遗传修饰、核心转录因子Oct4、Nanog和Sox2等,非编码RNA介导的转录后调控等多重机制的控制,但对于这些不同层次机制之间发生相互调控作用的机制尚未完全阐明.
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3月龄SD大鼠96只,随机分为骨折模型组(C组)、骨折+动员组(M)、骨折+振动组(V)和骨折+动员+振动组(M+V),每组24只.大鼠腹腔麻醉,制备骨折动物模型,72h后进行间歇机械振动(参数:频率30 Hz,振幅1 mm),以振动3 min×间歇2min为1组.1次/d×5 d/周×5周.动员组大鼠骨折3h后于皮下注射rhG-CSF(5 μg/kg/d×5 d).采用免疫组织化学与Wester
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