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目的 建立一种快速区分鼠痘病毒(ECT)、小鼠腺病毒(MAD)、小鼠巨细胞病毒(MCMV)和小鼠多瘤病毒(POLY)的多重液相芯片检测方法。方法 根据GenBank 中小鼠四种病毒基因组序列设计了四对特异性引物,通过优化反应体系和反应条件,对构建的重组质粒标准品进行检测,进行敏感性和重复性试验,同时用引物组对其他6种小鼠病毒及阴性小鼠脾脏DNA进行扩增检测特异性。最后用建立的方法对10 份实验室细胞样本及30 份小鼠临床样本进行检测,验证在临床应用中的效果。结果 所建立的检测方法特异性强,对其他10 种小鼠病毒未检测到信号,检测灵敏度达到100-500 拷贝/μL,对10份实验室细胞样本进行检测发现8份存在不相干的病毒污染,30份临床样本中有3份ECT阳性,2 份MAD 阳性,1 份POLY 阳性。结论 建立的多重液相芯片检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,方便实验动物病原筛查,适合用于ECT,MAD,MCMV,ECT 的临床诊断、日常监测和流行病学调查。