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目的:金属硫蛋白3(metallothionein 3,MT-3)基因是细胞内一种金属硫蛋白的编码基因,不仅具有其它MT的生理功能,还可以抑制细胞增殖。近几年来随着甲基特异性PCR(Methylation-specificPCR,MSP)的出现,基因甲基化与恶性肿瘤的关系方面的研究进展很快。本研究应用MSP和RT-PCR技术分别对5-氮2-脱氧胞苷(5-氮杂脱氧胞苷,5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理前后的五种食管癌细胞株的MT-3基因CpG岛甲基化情况和MT-3基因mRNA表达量进行研究,旨在阐明MT-3基因CpG岛超甲基化与食管鳞状细胞癌发生的关系。
方法:选取五种食管癌细胞株和正常人血液单核细胞,其中TE-1,TE-13,TTN和ECA-109为食管鳞状细胞癌细胞株,OE33为食管腺癌细胞株,应用MSP和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,在5-aza-CdR处理前后,对其MT3基因CpG岛的甲基化情况及mRNA的表达情况进行对比研究。
结果:4种食管鳞状细胞癌细胞株的MT3基因均存在不同程度的CpG岛超甲基化。经5-aza-CdR处理后,超甲基化状态解除,mRNA的表达也较处理前明显提高(P均<0.05)。
结论:食管鳞状细胞癌细胞株中MT3基因CpG岛的超甲基化可抑制其mRNA表达。当其超甲基化解除后,MT3基因的mRNA表达也会相应升高。