【摘 要】
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本试验以仔猪空肠上皮细胞IPEC-J2为模型,探究大豆抗原蛋白glycinin对仔猪上皮细胞通透性及紧密连接蛋白表达的影响,为进一步揭示大豆过敏蛋白诱导仔猪肠道损伤的相关机
【机 构】
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吉林农业大学动物科技学院,动物生产及产品质量安全教育部重点实验室,吉林省动物营养与饲料科学重点实验室,长春130118
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第七届中国饲料营养学术研讨会
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本试验以仔猪空肠上皮细胞IPEC-J2为模型,探究大豆抗原蛋白glycinin对仔猪上皮细胞通透性及紧密连接蛋白表达的影响,为进一步揭示大豆过敏蛋白诱导仔猪肠道损伤的相关机制提供依据.试验在细胞培养液中添加不同浓度(0、0.5、1、2或4 mg/mL)的glycinin,来刺激IPEC-J2细胞不同时间(0、6、12或24 h)后,测定跨上皮细胞电阻值(TEER),并在刺激24 h后测定细胞存活力(MTT值),并采用试剂盒检测细胞培养液中碱性磷酸酶(AP)的活性,反映大豆抗原glycinin对细胞通透性及完整性的影响.选择大豆抗原蛋白开始显著破坏肠上皮细胞处理浓度(2 mg/mL)和作用时间(24 h),采用免疫荧光染色和Western-blot方法检测肠上皮细胞紧密连接蛋白(ZO-1、occludin和claudin-3)的表达情况.
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