【摘 要】
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目的 研究mir-26b在食管癌细胞中的功能,E2F1转录调控mir-26b以及mir-26b负反馈调控E2F1信号通路的机制.方法 运用qRT-PCR技术检测食管鳞癌组织以及食管癌细胞株中mir-26
【机 构】
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第三军医大学基础部遗传教研室,重庆400038
【出 处】
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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议
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目的 研究mir-26b在食管癌细胞中的功能,E2F1转录调控mir-26b以及mir-26b负反馈调控E2F1信号通路的机制.方法 运用qRT-PCR技术检测食管鳞癌组织以及食管癌细胞株中mir-26b的表达.采用CCK8、流式细胞术检测mir-26b对食管癌细胞的增殖、细胞周期等生物学行为的影响.通过染色质免疫沉淀(ChIP)技术与荧光素酶报告基因实验,分别检测E2F1在mir-26b启动子区的结合情况,以及E2F1对mir-26b启动子区活性的影响.结果 与正常食管组织相比,mir-26b在食管鳞癌组织中的表达显著降低(p＜0.05).在食管鳞癌中外源过表达mir-26b后,抑制食管癌细胞的增殖,并且抑制G1/S期的转换.外源过表达E2F1或者通过化疗药物顺铂上调内源性E2F1的表达后,mir-26b在食管鳞癌中的表达升高.染色质免疫沉淀实验提示E2F1直接结合于rnir-26b的启动子区,而荧光素酶报告基因实验证实E2F1可通过mir-26b启动子区的E2F1结合位点上调基因的转录活性.进一步的研究发现,外源过表达mir-26b后,E2F1通路的上游基因CDK6与CyclinE表达降低,同时E2F1的表达也降低了.结论 我们的研究结果提示,mir-26b在食管癌中发挥抑癌基因的作用,E2F1与mir-26b相互调控形成负反馈通路,而在化疗等情况下,该通路发生异常,进而可以作为肿瘤治疗的靶点加以利用.
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