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目的:肌酸补剂产品主要包括磷酸肌酸、柠檬酸肌酸以及一水合肌酸。其中磷酸肌酸较难吸收,柠檬酸肌酸目前的研究及应用较少,最广泛应用的即为一水合肌酸,不仅溶解度好利于吸收且每克肌酸含量最高。肌酸类产品中通常含有微量杂质肌酐等,杂质含量较高时不仅影响效果且会对肾功能会构成危害,因而肌酸产品质量评定关键在于纯度高低,针对肌酸检测的传统方法主要有高效液相法及碱性苦味酸试剂法,而具有高灵敏度及专属性的高效液相色谱串联质谱技术（HPLC-MS/MS）检测方法的报道较少。本文旨在使用高效液相色谱-串联质谱建立肌酸含量的分析方法,从而对于肌酸补剂的有效成分进行准确测定。方法:由于肌酸分子极性较大而在常规色谱柱上保留较弱,采用RESTEKUltraAqueousC18亲水反相色谱柱（100mm×2.1mm,3μm）,色谱保留和峰型均良好;液相色谱采用二元线性梯度洗脱,流动相分别为乙腈和0.1%甲酸水溶液,柱温为40℃。精确称标准样品10mg置于11mL具塞玻璃试管中,添加10mL去离予水振荡溶解,再进一步稀释配置理论浓度为1ppm、500ppb、100ppb、50ppb、10ppb的工作溶液,1ppm浓度标准液用于针泵进样后的质谱条件优化,其他各浓度标准液做定量标准工作曲线,用于测定样品中肌酸浓度。样品经甲醇提取液溶解和沉淀蛋白,再经超声提取后高速离心,取上清液用纯水稀释后直接进样测定,样品平行进样3次。结果:通过质谱ESI电喷雾正离子模式下SCAN全扫描发现,一水合肌酸会脱去一个水分子,产生加氢峰,形成m/z为132.1的分子离子峰,主要的碎片离子包括m/z90.0、87.1、72.1（碰撞能量CE值分别为22V,23V,35V）,选取离子对132.1—90.0为定量离子对,即肌酸分子脱掉一个氨基氰（CN2H2）后的碎片离子。定性分析通过目标离子峰的出峰时间以及三对碎片离子之间的相对丰度比确定,定量测定通过标准工作曲线外标法计算。测定结果显示实验方法回收率达到90%,各浓度标准液测定结果精密度范围为3.70%10.6%,在10500ppb（ng/mL）的质量浓度范围内呈现良好的线性关系,线性相关系数r=0.991,定量限信噪比良好（S/N≥10）。结论:建立了肌酸补剂中有效成分一水合肌酸的高效液相色谱-串联质谱测定方法,样品采用稀释和沉淀蛋白后直接进样,避免了净化过程中的损耗和提取试剂的污染,结果显示该方法具有良好的回收率和精密度,线性范围达到10500ppb,具有较低的定量限和较高的灵敏度,实验结果准确可靠,适用于肌酸补剂含量的测定及肌酸类物质的有效补充和调控。