乙型肝炎病毒感染的细胞模型建立

来源 :中华预防医学会消毒分会2010学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vsrabbithhf
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目的:研究人端粒酶逆转录酶(human telomerase reveretranscfiptase,hTERT)修饰的成人肝细胞(HC-T)对HBV的易感性。以建立HBV体外培养系统,为HBV的病毒灭活效果评价提供细胞培养模型。方法:HC-T细胞经RT-PCR和免疫荧光鉴定后,用HBV阳性血清直接感染,ELISA和实时定量PCR检测细胞培养上清中的HBsAg和HBV DNA,免疫荧光法检测细胞内的HBcAg。结果:RT-PCR结果显示:修饰后的肝细胞中可检测到肝特异性基因ALB、TF和GS的mRNA,而未检测到原癌基因AFP的mRNA;免疫荧光显示CK18较均匀地分布于HC-T细胞细胞质内,而细胞核内则未见;HC-T细胞经HBV阳性血清直接感染后,ELISA和实时定量PCR结果显示:上清中可检测到HBsAg和HBV DNA,且水平基本一致;免疫荧光发现细胞内HBcAg主要定位在细胞浆内,偶可见细胞核内。结论:HC-T细胞与原代成人肝细胞相比,其未发生明显改变,可以自然感染HBV,这为HBV的病毒灭活效果评价提供了细胞模型,对于保证输血安全具有重要意义。
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