空肠弯曲杆菌大环内酯类耐药产生机制和适应性分析

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【目的】分析空肠弯曲杆菌对大环丙酯类耐药性的产生机制和相关适应性。【方法】将两株来自不同地区的空肠弯曲杆菌菌株(C.jejuni ATCC 33291和实验室分离菌株H1)用固定浓度的泰乐菌素进行体外长期诱导,以获得耐药菌。对所获得的耐药菌进行体外长期进化试验,以获得进化菌。PCR扩增和测序用于分析耐药菌和进化菌对大环丙酯类药物的耐药相关突变。生长曲线和配对竞争生长试验用于反映和评价敏感菌、耐药菌以及进化菌分别在单纯的和混合的生长环境下的生长力和相对适应性。【结果】两株母源敏感菌在固定浓度的泰乐菌素的长期诱导条件下,逐渐获得了对大环内酯类药物的高水平耐药,而且这种耐药性表现出很强的稳定性。测序结果发现这些稳定的高水平耐药菌株在其23S rRNA的三个重复子上都含有A2074C的点突变。由配对竞争试验获得的相对适应性结果显示含有此突变点的耐药菌在没有药物选择压力下表现出一定的适应性代价,当耐药菌和敏感菌共同孵育的时候,耐药菌的竞争力相对敏感菌弱,在长期孵育过程中,耐药菌会逐渐被敏感菌所取代。经过长期进化实验.这些耐药菌株的适应性代价并没有获得补偿。【结论】虽然空肠弯曲杆菌在长期药物作用环境下可以表现出对大环丙酯类药物的高水平耐药性,但是这些耐药菌株在没有药物选择压力下,会逐渐被敏感菌取代。
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