乌苏里貉IgGγB基因的克隆及其蛋白一级结构比较分析

来源 :2014年全国毛皮动物专业学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangwang09
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此本研究从乌苏里貉脾脏内提取RNA,通过对乌苏里貉IgGγB基因克隆、遗传进化分析及蛋白结构分析进行抗原性比较分析,为指导临床乌苏里貉疾病的免疫检测提供了理论依据。本研究根据GenBank上发布的水貂IgG(L07789.1)和犬IgGγ(AF354264.1、AF354265.1、AF354266.1、AF354267.1)的序列,设计合成两对引物,从乌苏里貉脾脏中提取总RNA,RT-PCR分别扩增两端保守基因,获得大小约535bp和464bp的片段,将其连接PMD18-T载体并测序拼接获得966bp的片段,首次成功克隆乌苏里貉的IgGγB基因(GenB ank:KM010191),通过蛋白结构分析及与犬、人、小鼠等遗传进化对比分析,结果显示乌苏里貉IgGγB基因与犬IgGγ(A、B、C、D)四个亚型基因序列同源性最为接近分别为88.8%、93.6%、87.2%、87.3%,与犬氨基酸序列同源性分别为82.2%、91%、81.9%、79.5%,同时对乌苏里貉IgGγB蛋白结构有了较为清晰的认识,从而为用犬的诊断试剂或犬血清检测治疗乌苏里貉疾病提供一定的理论依据.
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