人种植前囊胚滋养层细胞吞噬现象的观察研究

来源 :广东省医学会第四次生殖医学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljh163com
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  目的 种植前囊胚由滋养层(TE)和内细胞团(ICM)构成,TE分为极区和壁区,极区TE覆盖ICM,壁区TE远离ICM.小鼠中,囊胚以壁区与子宫内膜接触并着床,但人类囊胚以极区TE种植.小鼠ICM分泌FGF4促进极区TE有丝分裂而壁区出现吞噬等分化相关现象.人类胎盘生成过程中分化出具有吞噬能力的滋养巨细胞,已证实人类种植前囊胚TE已有滋养巨细胞的分化,但目前尚无研究证实人种植前TE细胞的吞噬现象.本课题以α-地中海贫血周期不可移植囊胚为样本来源,观察人种植前囊胚TE的吞噬能力,对TE可能的分化进行推测.方法 1.荧光微球示踪实验:将稀释后浓度为10μg/ml的绿色荧光微球加入G2囊胚培养液,第5天(D5)优质囊胚去透明带后转移人已平衡的培养液,和荧光微球过夜共孵育.以0.02%胰酶彻底清洗非特异性粘附的微球后,在荧光显微镜下观察微球在囊胚的分布模式;2.透射电镜实验:将囊胚固定后进行超薄切片,设定每个囊胚切片6张.分为D5囊胚组和D6囊胚组:D5组为第5天囊胚与荧光微球共孵育7小时后切片行透射电镜观察,D6组为第5天囊胚与荧光微球共孵育过夜后于第6天切片行电镜观察,分别对两组TE对荧光微球的吞噬能力进行观察研究.结果 1.荧光微球示踪实验提示人类囊胚荧光微球具有极性分布,即极区TE荧光微球的绿色信号明显高于极区,荧光微球分布较多.2.透射电镜下观察可见:①D6组30张囊胚超薄切片均可见TE胞内吞噬荧光微球,细胞表面形成突起对荧光微球进行包裹吞噬;②D5组共24张切片,透射电镜下均未见TE细胞吞噬荧光微球的现象;③TE内侧胞膜表面形成微绒毛对囊腔内碎片(直径>1μm)包裹吞噬.结论 1.人类种植前囊胚滋养层细胞存在吞噬,可吞噬异物和囊腔内碎片.2.吞噬可能是围种植期TE极区和壁区分化的表现,推测是人类囊胚极区种植相关的分化.
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