【摘 要】
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目的建立重要虫媒病毒实时荧光定量RT PCR快速检测方法。方法根据登革1~4型病毒、乙型脑炎病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、基孔肯雅病毒基因组序列,经系统的序列比对分析,设计
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目的建立重要虫媒病毒实时荧光定量RT PCR快速检测方法。方法根据登革1~4型病毒、乙型脑炎病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、基孔肯雅病毒基因组序列,经系统的序列比对分析,设计检测引物及探针,基于Taq Man探针法,并以GAPDH管家基因为内参照、以克隆的检测靶标为阳性标准品,建立重要虫媒病毒快速检测技术。结果分别建立了登革1~4型病毒通用检测与分型,基孔肯雅病毒、乙型脑炎病毒、西尼罗河病毒及黄热病毒的实时荧光定量RT PCR快速检测方法。所建立方法与所试相近虫媒病毒无交叉反应,检测的荧光信号值与模板浓度具备良好的线性关系,其R2值介于0.981~0.999之间,检测下限介于5.23~16.22拷贝之间,具备较高的检测敏感性与覆盖面。结论建立了登革1~4型病毒通用检测与分型、乙型脑炎病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、基孔肯雅病毒的实时荧光定量RT PCR快检方法。
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