【摘 要】
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目的:研究经典补肾方药-左归丸对自然衰老大鼠CD4+T细胞IL-2基因启动子CpG位点甲基化水平的影响.方法:以自然衰老大鼠为模型,分组:青年对照组;老年对照组;老年左归组.流式细胞
【机 构】
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上海中医药大学基础医学院生化教研室,上海
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目的:研究经典补肾方药-左归丸对自然衰老大鼠CD4+T细胞IL-2基因启动子CpG位点甲基化水平的影响.方法:以自然衰老大鼠为模型,分组:青年对照组;老年对照组;老年左归组.流式细胞仪分选各实验组大鼠CD4+T细胞,以anti-CD3联合anti-CD28进行刺激.Q Real time RT-PCR法检测IL-2mRNA的表达;ELISA法检测DNMTs活性,甲基化特异性PCR(MSP)法检测IL-2基因启动子CpG位点甲基化水平.结果:anti-CD3联合anti-CD28刺激24h后,与青年对照组比较,老年对照组CD4+T细胞IL-2mRNA表达显著降低(P<0.01);DNMTs活性显著增强(P<0.01),IL-2基因SET1区域甲基化水平显著升高(P<0.01).与老年对照组比较,老年左归组CD4+T细胞IL-2mRNA表达明显升高(P<0.05);DNMTs活性明显减弱(P<0.05),IL-2基因SET1区域甲基化水平明显降低(P<0.05).结论:在体外anti-CD3联合anti-CD28刺激下,老年大鼠CD4+T细胞内DNMTs活性增强,使IL-2基因SET1区域维持高甲基化水平,IL-2表达下降.左归丸能通过抑制DNMTs活性,降低IL-2基因SET1区域甲基化水平,从而促进IL-2表达.
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