目的:在精准治疗和个体医疗的新时代,寻找特异性肿瘤标志物以及有效的基因靶点已经成为急需突破的关键问题。环状RNA是近年来被重点关注的小RNA分子,广泛参与癌症的疾病进程,在肿瘤组织和细胞中表达改变的环状RNA不仅能在肿瘤的发生发展中起作用,还能作为新的肿瘤标记物来帮助肿瘤的诊断和治疗。本课题拟通过RNA测序寻找到一个在鼻咽癌细胞系和鼻咽癌患者中高表达且与癌症转移相关的环状RNA,并进行功能和机制的研究,为鼻咽癌的诊断治疗提供新思路。方法:1.利用RNA测序筛选在鼻咽癌细胞系5-8F细胞中高表达的环状RNA。2.利用RtPCR检测Circ₀003486在正常鼻咽组织和鼻咽癌组织中的表达差异,并分析对癌症侵袭转移能力的影响。3.在鼻咽癌细胞系中利用质粒载体过表达Circ₀003486,利用siRNA敲低Circ₀003486。利用划痕愈合实验和transwell实验来检测癌细胞迁移和侵袭能力的改变。4.利用全蛋白质谱检测与Circ₀003486相关的蛋白,并通过生物信息学分析Circ₀003486调控的蛋白以及富集的通路。结果:1. RNA测序共筛选到6153个环状RNA,根据测序所得的RPM值,筛选出在鼻咽癌细胞5-8F中高表达的Circ₀003486。2. RtPCR结果表明临床样本中鼻咽癌组织的Circ₀003486表达量高于正常组织,且与癌症淋巴转移相关。3.划痕愈合实验和transwell实验表明过表达Circ₀003486分子的鼻咽癌细胞侵袭和迁移能力显著增强而抑制Circ₀003486分子的鼻咽癌细胞侵袭和迁移能力显著降低。4.通过全蛋白质谱分析影响鼻咽癌迁徙和侵袭的机制,根据Area比值得到20个上调的基因和41个下调的基因,对差异基因进行生物信息学分析,KEGG分析显示,大多数差异基因富集到糖代谢,氧化磷酸化,核苷酸代谢,蛋白质合成和RNA转运相关通路,推测Circ₀003486可能通过影响鼻咽癌细胞代谢和蛋白质合成来影响其功能。结论:1.通过RNA测序,首次鉴定Circ₀003486在鼻咽癌组织中的高表达及与癌症转移相关,可作为鼻咽癌患者诊断和治疗新的分子标志物。2.首次证明Circ₀003486促进鼻咽癌细胞的迁移和侵袭,干扰Circ₀003486的表达可能作为潜在的鼻咽癌治疗新方法。