AMP依赖的蛋白激酶介导的自噬对血管内皮细胞的保护机制研究

来源 :中华医学会糖尿病学分会第十九次全国学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxiaoshixisheng
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目的 观察AMPK激活对血管内皮细胞自噬的影响并进一步探讨AMPK介导的自噬对高游离脂肪酸所致血管内皮细胞损伤的影响.方法 采用不同浓度棕榈酸和AICAR处理人主动脉血管内皮细胞24 h,CM-H2DCFDA荧光探针检测细胞内ROS水平;应用CA-AMPK过表达AMPK,或采用特异小分子干扰核糖核酸(siRNA)抑制AMPK表达,在mRNA水平和蛋白质水平检测抗氧化剂Trx及LC3蛋白的表达;采用自噬特异性基因atg7siRNA处理血管内皮细胞,RT-PCT及Western blotting检测Trx mRNA及蛋白表达,CM-H2DCFDA荧光探针检测细胞内ROS水平.
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