【摘 要】
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氧化应激过程产生的大量活性氧类物质会对细胞内蛋白或DNA等生物大分子造成损伤.8-oxodGuo是一种主要的DNA氧化损伤产物.DNA复制时,这种损伤常常会导致G→T的突变.因为8-oxod
【机 构】
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中国科学院生态环境研究中心 北京 100085
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氧化应激过程产生的大量活性氧类物质会对细胞内蛋白或DNA等生物大分子造成损伤.8-oxodGuo是一种主要的DNA氧化损伤产物.DNA复制时,这种损伤常常会导致G→T的突变.因为8-oxodGuo不仅能与碱基C配对,还可以与碱基A配对.如果该损伤不能及时被修复,则会导致基因不稳定,从而产生基因或遗传毒性.在医疗诊断领域,病人尿液中8-oxodGuo水平常被作为评价个体癌变危险或诊断与自由基相关疾病的生物标记物.因此准确、灵敏、快速的检测8-oxodGuo非常有意义.在本研究中想合成一种探针可以特异性的检测8-oxodGuo。8-oxodGuo在氧化剂作用下能够形成一种醌类物质,而精胺与该醌类物质发生亲和加成反应。基于这个原理,约翰霍普金斯大学的Greenberge研究组合成了一种精胺一生物素分子探针(Spermine-Biotin)。探针中的精胺在氧化剂存在的条件下先与8-oxodGuo反应实现特异性识别,然后通过生物素部分与酶标亲和素连接,建立了一种类似酶联免疫的荧光检测方法。这种方法具很高的特异性和灵敏度。
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