【摘 要】
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本研究针对高热症疫情,分离猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),研究分离毒的分子遗传进化特征,进而探讨PRRSV在高热症疫情中的作用.利用Marc-145细胞从浙江杭州等11个地区35个养殖场152份患病猪病料中共分离到9株PRRSV毒株;测序结果显示,1株Nsp2基因无缺失,2株Nsp2基因481L缺失1个氨基酸,6株Nsp2基因有30个氨基酸缺失(481L有1个氨基酸缺失, 532-560位
【机 构】
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浙江大学动物预防医学研究所,浙江 杭州 310029 北京市宣武区第三职业学校 北京 浙江大学动物
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
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本研究针对高热症疫情,分离猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),研究分离毒的分子遗传进化特征,进而探讨PRRSV在高热症疫情中的作用.利用Marc-145细胞从浙江杭州等11个地区35个养殖场152份患病猪病料中共分离到9株PRRSV毒株;测序结果显示,1株Nsp2基因无缺失,2株Nsp2基因481L缺失1个氨基酸,6株Nsp2基因有30个氨基酸缺失(481L有1个氨基酸缺失, 532-560位连续29个氨基酸"SRPVTPLSEPIPVPAPRRKFQQVKRLSSA"的缺失),符合高致病性PRRSV毒株特性;遗传进化分析显示,除1株无氨基酸缺失的毒株来源于疫苗株外,其余8株均为野毒株,并且与高致病性PRRSV高度同源.
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本试验将27只六周龄SPF昆明小鼠随机分为三组:阴性对照组12只、一次性攻毒组12只、连续攻毒组3只.阴性对照组和连续攻毒组于第0天分别接种1640培养液1ml和PCV2细胞培养毒1ml(TCID50=107/ml),连续攻毒组应用相同的接种剂量和接种方式于第0、7、14、28、35天进行PCV2接种.阴性对照组和一次性攻毒组分别在接种后7、14、28和42天处死,连续攻毒组在首次接种后42天处死
本研究在实验室前期研究的基础上,选取4个有效抑制猪瘟病毒增殖的干扰基因N1、N2、S10和S11,其中N1和N2针对Npro基因,S10针对NS3基因,S11针对NS4A基因,进行逆转录病毒栽体介导的抑制猪瘟病毒增殖的研究.首先包装出重组逆转录病毒,感染PK-15细胞获得稳定表达干扰基因的细胞克隆,然后采用间接免疫荧光、荧光定量PCR和病毒滴度三种方法测定了细胞表达的shRNA抑制猪瘟病毒增殖水平
利用抗猪瘟病毒高免血清和猪瘟病毒特异的单克隆抗体充当免疫压力,体外构建猪瘟病毒在免疫压力下的进行传代的细胞模型,进行了免疫压力下猪瘟病毒遗传变异研究.结果表明:在免疫压力下,猪瘟病毒在细胞水平进行传代后,未表现出逃逸抗体中和作用的表型.该研究为我国现行的猪瘟防疫政策的制定奠定了理论基础,为进一步研究猪瘟病毒遗传变异机制奠定抗基础.
通过对吉林省、辽宁省部分地区流行病学调查,获得猪"无名高热"发病情况资料.电镜直接观察所收集到的病料,主要为猪繁殖与呼吸综合症病毒、副粘病毒、猪瘟病毒形态;将吉林省的无名高热病病料中分离到的副粘病毒、病料原液以及由病料制得的自家灭活疫苗接种到血清检测无名高热主要病原抗体阴性的健康猪仔,同时设立阴性对照,对临床感染的仔猪进行了病理变化、病毒分离、细菌检测等方面的鉴定分析,对无名高热病病原的致病特点、
为了研究高效广谱的基因工程抗病毒制剂,本研究设计引物自猪肝脏总DNA扩增、克隆猪α干扰素(PoIFN-α)成熟肽基因并亚克隆入pQE30载体进行原核表达,对表达的融合重组猪α干扰素(rPoIFN-α)蛋白通过尿素变性,低浓度蛋白复性液复性、PBS溶液透析等步骤进行纯化,采用细胞病变抑制法分别测定rPoIFN-α蛋白在PK15细胞上抗水泡性口炎病毒(VSV)增殖活性及在Marc-145细胞上抑制高致
猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种高度传染性疾病,主要引起母猪繁殖障碍、各年龄猪呼吸道症状,仔猪高死亡率等,同时还会导致免疫抑制而继发多种其他疾病.近年来,猪繁殖与呼吸综合征病毒给我国养猪业造成了巨大的经济损失,研究表明从PRRSV基因组的变异、介导该病毒感染的细胞受体及剧烈炎症反应的发生等方面有利于揭示PRRSV致病的分子基础.本丈主要对猪繁殖与呼吸综合征病毒受
对2006年湖南猪高热病暴发期间的458例病猪和460份血清进行病原和血清抗体检测.共分离鉴定到46株细菌,其中有6株为猪链球菌(包括4株2型猪链球菌);2株巴氏杆菌,38株肠杆菌科细菌.用ELISA或PCR方法检测CSFV、PRRSV、PCV-2、PPV、SIV、JEV和PRV等,结果CSFV的抗原阳性率为10.7％,PRRSV的抗原阳性率为45.2％,PCV-2的抗原阳性率为24.5％,SIV
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为了获得欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)弱毒疫苗AMERVAC-PRRS/A3株的病毒基因组感染性cDNA克隆,为研究深入欧洲型PRRSV提供工具,通过RT-PCR技术扩增了欧洲型PRRSV活疫苗AMERVAC-PRRS/A3弱毒株的全基因组,并测序.根据测序结果,选择合适的酶切位点将
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