黄芪多糖对过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

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目的观察黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)对过氧化氢损伤的人视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用。方法培养的人视网膜色素上皮细胞系(humar retinal pigment epithelium,ARPE-19)分为正常对照组、过氧化氢损伤组和不同浓度(1000 mg·L-1、500 mg·L-1)APS干预组,正常对照组不做处理,过氧化氢损伤组加入200μmol·L-1的过氧化氢,APS干预组加入不同浓度(1000 mg·L-1、500 mg·L-1)APS后加入200μmo1·-1的过氧化氢。用倒置荧光显微镜观察各组细胞形态变化;MTT检测细胞活性;DAPI染色观察细胞核形态学变化;实时细胞电子分析系统(real-time cell electronic sensing system,RT—CES)实时记录细胞生长状态;应用caspase-3活性检测试剂盒测定各组细胞中caspase-3的活性。结果过氧化氢损伤组细胞皱缩,悬浮细胞增多,APS干预后细胞状态改善。MTT显示1000 mg·L-1、500 mg·L-1浓度的APS孵育24h后细胞存活率分别为(99.86±3.64)%和(101.03±3.52)%,与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),过氧化氢损伤组细胞存活率为(56.49±2.30)%,比正常对照组显著降低,不同浓度黄芪多糖干预后,细胞存活率升高到(88.14±2.97)%和(80.75±3.13)%,与过氧化氢损伤组相比差异具有显著地统计学意义(均为P<0.01)。DAPI染色显示正常细胞核均匀淡染,过氧化氢损伤组出现强荧光点和致密的细胞核,APS处理后凋亡程度减轻。RT—CES显示APS处理可以减少过氧化氢造成的细胞损伤。Caspase-3检测发现过氧化氢造成细胞caspase-3水平升高,APS处理后caspase-3水平下降。结论 APS可以抑制过氧化氢诱导的ARPE—19的凋亡,这为APS的临床应用提供了一定的实验基础。
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