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建立了利用气相色谱-燃烧-同位素比率质谱仪(GC-C-IRMS)测定尿素中13C和15N值的方法.尿素经丙二醛-二甲基乙缩醛在酸性环境下反应生成2-羟基嘧啶,之后由重氮甲烷甲基化,形成2-甲氧基嘧啶经GC-C-IRMS测定.衍生方法和GC条件经GC-FID确认优化.对比不同13C(0％-1％APE)和15N(0-5％ MPE)丰度的尿素由元素分析-同位素比率质谱仪(EA-IRMS)和GGC-IRMS的测定结果,二者相关性良好,R2分别为0.9997和0.9998.该方法对于尿素中13C和15N重复性RSD为别为0.15％和0.21％,日间精密度分别为0.18％和0.24％.之后应用该方法对酵母发酵液中尿素以及胞内尿素进行了测定,为低稳定同位素标记尿素示踪实验以及尿素循环代谢研究提供了方法基础.