hTERT重组绿色荧光表达载体的构建及其转染正常髓核细胞的初步研究

来源 :2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gfgfiiii
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  目的 采用外源性端粒酶反转录酶(hTERT)基因转导入髓核细胞激活端粒酶的方法,探讨一种新的获得永生化髓核细胞株的组织工程技术,为进一步研究退行性椎间盘病的病变机理提供标准细胞株.方法 用PCR方法将PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳分离、鉴定,按快速凝胶回收试剂盒说明书方法回收纯化PCR产物, 获得目的基因PCR产物与载体T-Easy按比例进行连接进行目的基因克隆;用DNASIS软件对所测的基因序列和氨基酸序列与GenBank公布的序列进行同源性比较进行真核表达质粒中目的基因序列测定;构建目的基因pGFP-hTERT真核表达质粒;用BIOMIGA质粒提取试剂盒进行转染hTERT表达检测.结果 2.1 RT-PCR扩增目的基因hTERT片段的结果
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