【摘 要】
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运用改良电融合的方法,提高杂交瘤的融合效率,以获得更多的杂交瘤克隆.将SP2/0细胞和脾细胞分别用NHS-d-PEG24-biotin孵育30min,再将脾细胞用avidin孵育30min,然后将SP2/0细
【机 构】
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重庆市畜牧科学院,重庆 402460
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运用改良电融合的方法,提高杂交瘤的融合效率,以获得更多的杂交瘤克隆.将SP2/0细胞和脾细胞分别用NHS-d-PEG24-biotin孵育30min,再将脾细胞用avidin孵育30min,然后将SP2/0细胞和脾细胞按1:5混合孵育15min后进行电融合,融合后的细胞用半固体培养基筛选单克隆.结果显示,用2×105个SP2/0细胞和1×106个脾细胞进行正常电融合,经半固体培养基筛选共获得6个单克隆,而用改良电融合法获得了20个单克隆.通过改良电融合的方法能够增加异种细胞相互配对几率,从而提高杂交瘤的融合效率,最终获得更多的杂交瘤细胞.
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