对虾白斑综合征病毒的核衣壳蛋白VP15的核定位研究

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VP15是对虾白斑综合征病毒(WSSV)的一个主要核衣壳蛋白。该蛋白的基因序列中有4个核定位信号(NLS)。在本论文中,将vp15和绿色荧光蛋白基因融合在一起克隆至瞬时表达载体pIZ/V5—His,经酶切鉴定获得阳性的重组质粒后.提取纯化重组质粒并转染昆虫细胞Sf21进行融合表达。结果表明,转染后24h可以在荧光显微镜下观察到绿色荧光,表明融合蛋白在昆虫细胞内成功表达。分别取转染后不同时相的细胞在激光共聚焦显微镜下进行观察,在36h,48h的观察结果显示,荧光主要集中分布在细胞核内,初步确定了VP15的核定位功能。
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