重组腺病毒介导shRNA干扰坦布苏病毒在体外复制的研究

来源 :中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunzhaojian
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  坦布苏病毒(Tembusu virus,TMUV)是导致肉鸭神经症状及产蛋鸭出血性卵巢炎(duck hemorrhagicovaritis,DHO)的主要病原.自2010年首次分离得到坦布苏病毒以来,该病由最初的华东地区迅速蔓延至全国主要水禽养殖地区,对养鸭业造成了严重的危害.本研究针对TMUV的E和NS5基因分别设计构建了三个特异性shRNA(short hairpin RNAs)表达载体.结果显示,pSilencer-E1及pSilencer-NS52的对病毒复制的抑制效果最佳,抑制效率分别为74%及86%.采用AdMax载体系统构建重组腺病毒pAd-NS52.结果显示pAd-NS52可以显著抑制TMUV在HEK293细胞中的复制.试验中发现pAd-NS52的抑制效果与感染剂量有关,当感染剂量500个MOI时,抑制效果为88%.
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