【摘 要】
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目的：初步确认了人轮状病毒对树鼩原代小肠上皮细胞的感染性,研究了轮状病毒在树鼩原代小肠上皮细胞上的增殖特性.方法：采用胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法获取树鼩小肠上皮细胞,并采用消化排除法获取单一小肠上皮细胞.用轮状病毒感染树鼩小肠上皮细胞,采用梯度稀释、荧光定量PCR等方法检测病毒的最适感染复数及在细胞内的增殖特性.结果：获取生长状态良好且单一的小肠上皮细胞,将轮状病毒分别以MOI=1,2,3,
【机 构】
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昆明理工大学生命科学与技术学院,云南省分子医学研究中心,昆明650500,云南
【出 处】
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第十四届中国西部实验动物管理与学术交流会
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目的：初步确认了人轮状病毒对树鼩原代小肠上皮细胞的感染性,研究了轮状病毒在树鼩原代小肠上皮细胞上的增殖特性.
方法：采用胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法获取树鼩小肠上皮细胞,并采用消化排除法获取单一小肠上皮细胞.用轮状病毒感染树鼩小肠上皮细胞,采用梯度稀释、荧光定量PCR等方法检测病毒的最适感染复数及在细胞内的增殖特性.
结果：获取生长状态良好且单一的小肠上皮细胞,将轮状病毒分别以MOI=1,2,3,4接种于树鼩小肠上皮细胞,经测定发现MOI=3时,病毒的载量最大.采用梯度稀释法和荧光定量PCR法分别测定病毒在增殖过程中滴度和载量的变化,并绘制病毒增殖曲线.发现病毒在第一天感染时有较低的滴度和载量,2-3天呈现一个指数增长的趋势,并在第3天达到一个平台期并随着时间的延长呈现一个降低的趋势.
结论：成功获取了树鼩小肠上皮细胞并初步验证了轮状病毒在树鼩小肠上皮细胞上的感染性,为后续轮状病毒的深入研究奠定了基础.
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