农杆菌介导的小麦全蚀病菌的遗传转化体系的建立

来源 :中国植物保护学会2015年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lalabingku
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  由禾顶囊壳菌小麦变种(Gaeumannomyces graminis var.tritici,Ggt)引起的小麦全蚀病菌,是一种世界范围内发生的毁灭性病害.利用分子生物学技术揭示该病菌致病的分子机理,从根本上揭示小麦全蚀病菌的致病机理,对小麦全蚀病菌的有效预防具有重要意义.本研究利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化方法对小麦全蚀病菌进行了转化,初步建立了农杆菌介导的小麦全蚀病菌遗传转化体系,即最佳抑制小麦全蚀病菌的潮霉素浓度为90μg/mL,IM培养基中乙酰丁香酮(AS)浓度为200μM/L,农杆菌诱导时间为6h OD600 =0.15,之后取200μL农杆菌菌液与研磨后的小麦全蚀菌混匀后,在覆盖有玻璃纸的AIMA上共培养2天,将玻璃纸转移至PDA(含90μg/mL hyg,400μg/mL cef,60μg/mL str)上25℃共培养4天.本研究建立的根癌农杆菌介导的遗传转化体系进一步建立插入突变体库、筛选致病突变体等的技术平台,进而为克隆相关基因,深入解析小麦全蚀病菌的致病机理奠定基础,最终为病害的有效防治提供有效的思路.
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