【摘 要】
：
淋巴细胞抗原75 (Ly75)是一种Ⅰ型跨膜表面蛋白,属于C型凝集素超家族成员。已有研究表明Ly75在鱼类的性腺中表达量比较高,且只在特异的精细胞中表达。为了解Ly75在罗非鱼中的功能,本研究采用同源克隆和RACE技术克隆了尼罗罗非鱼Ly75(OnLy75)的cDNA全序列,结果显示OnLy75的cDNA序列全长为6632bp,开放阅读框5199bp,编码1732个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明
【机 构】
：
农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,珠江水产研究所,中国水产科学研究院,广州,510300;上海海洋大学,水产与生命技术学院,上海201306
论文部分内容阅读
淋巴细胞抗原75 (Ly75)是一种Ⅰ型跨膜表面蛋白,属于C型凝集素超家族成员。已有研究表明Ly75在鱼类的性腺中表达量比较高,且只在特异的精细胞中表达。为了解Ly75在罗非鱼中的功能,本研究采用同源克隆和RACE技术克隆了尼罗罗非鱼Ly75(OnLy75)的cDNA全序列,结果显示OnLy75的cDNA序列全长为6632bp,开放阅读框5199bp,编码1732个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,OnLy75与金枪鱼Ly75的同源性最高,达65％。此外,还构建了OnLy75的原核表达载体,经IPTG诱导后可在包涵体中获得OnLy75重组蛋白。将纯化后的OnLy75重组蛋白免疫新西兰大白兔,经亲和纯化后获得了兔抗尼罗罗非鱼OnLy75多克隆抗体。使用该多抗对尼罗罗非鱼不同器官进行Westernblot内源性检测,结果显示该蛋白在精巢中有丰富的表达,说明OnLy75多克隆抗体制备成功。
其他文献
细胞凋亡在许多生理过程和免疫应答中发挥着重要的作用,BOK基因是细胞凋亡中一个关键的调控因子。本研究对斜带石斑鱼BOK(Ec-BOK)基因进行了克隆及功能分析。结果 表明,Ec-BOK基因可以编码210个氨基酸,其含有4个保守的功能结构域(BH1-4)和1个跨膜区(TM),蛋白序列与深裂眶锯雀鲷该蛋白相似度最高,为97％。荧光定量分析表明Ec-BOK基因在多种组织中均有表达,其中肝脏和肾脏中表达量
斜带石斑鱼是一种重要的海水经济养殖鱼类,病害是制约水产养殖业的一个重要的因素.近年来,葡聚糖作为一种新型的天然免疫增强剂在水产养殖中得到广泛的应用.本文,我们使用腹腔注射法免疫斜带石斑鱼,在免疫后的6h和72h分别取头肾,淋巴细胞,胸腺和脾脏组织进行转录测序.转录组测序结果一共组装了175568条Unigene,平均长度是1507bp.通过Blast比对数据库进行功能注释,一共注释了121629条
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,vp)是一种重要的水生动物来源的人畜共患的病原菌,能引起海水动物及人类严重的弧菌病.为了研究嗜中性粒细胞在Vp感染中的作用,我们将红色荧光蛋白(RFP)标记了一株致病菌Vp57,利用斑马鱼模型测试标记前后毒力变化及引起的疾病症状,并观察嗜中性粒细胞与Vp感染之间的动态过程.结果 显示细菌毒力在RFP标记前后没有变化,并能在宿主中引起相似的
本研究对东部沿海的脊尾白虾4个野生群体共计124个样本的ITS1序列进行了分析.结果 显示,124个样本的ITS1序列长度为388-583bp,平均GC含量高于AT含量.124个样本共检测到604个变异位点,123个单倍型,多态位点比例为46.7％；遗传多样性分析显示,盐城群体遗传多样性指数最高,象山群体最低.在脊尾白虾ITS1序列中发现微卫星序列共有8处,重复序列类型为(GA)n,(AG)n,(
为了初步调查华南地区无症状锦鲤鲤疱疹病毒3型(Cyprinid Herpesvirus 3,CyHV-3)潜伏感染的状况,本研究运用巢式PCR和抗体ELISA的方法对来自广州、佛山和东莞三个城市的锦鲤样品进行CyHV-3 DNA和血清抗CyHV-3抗体检测.巢式PCR结果显示,CyHV-3DNA在不同地区的锦鲤鳃液或白细胞样品中能不同程度检出,其中,广州、佛山和东莞锦鲤的鳃液和白细胞DNA阳性率分
东北七鳃鳗(Lampetra morii)是现存最古老的无颌类脊椎动物之一,对其免疫系统的研究在理论上有着重要的进化意义.白细胞介素-8 (Interleukin8,IL-8)是一种趋化因子,研究发现IL-8能促进炎性反应进程、刺激血管的发生、调节宿主免疫功能等.为了研究东北七鳃鳗IL-8的功能,先扩增出IL-8基因,然后利用pColdI载体在E.coli BL21中进行表达,之后使用镍柱进行蛋白
采用超高效液相色谱—串联质谱联用(UPLC-MS/MS)测定分析鳗鲡发育成熟过程中血清内六种类固醇激素：睾酮(T)、17α-羟基孕酮、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮(DHP)、雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)以及性腺中四种类固醇激素(T、DHP、E2、E3)激素的含量变化。结果 表明,随着鳗鲡性腺发育,实验组鳗鲡血清及性腺中类固醇激素的含量呈逐步增加的趋势,其中,实验组鳗鲡血
建立模式生物斑马鱼胚胎进行化学品毒性鉴定的方法.方法将健康的亲代成熟斑马鱼进行交配产卵，产卵后收集斑马鱼胚胎，于6hpf将斑马鱼胚胎暴露于梯度浓度的甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇，在暴露后120 h内，观察斑马鱼胚胎的发育状况.结果 甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇暴露后，随着剂量的升高，斑马鱼胚胎在各观察时间点出现死亡或不发育的现象，甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇对斑马鱼胚胎的96 h LD50分
大防御素是一种具有广谱抗菌活性的抗菌肽，是参与生物先天性免疫的关键因子，具有杀灭病菌、保护机体的作用.本研究选取双壳类软体动物紫贻贝的大防御素成熟肽基因mMGBD作为研究对象，根据毕赤酵母的密码子偏爱性对该基因进行优化合成，将其与表达载体pPICZαA连接后电转至毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33中，得到的阳性转化子在29℃、经0.75％甲醇诱导表达72小时后，通过SDS-PAGE
Ikaros是一种C2H2型锌指蛋白类转录因子,对淋巴细胞的发育具有重要作用.为了揭示尼罗罗非鱼Ikaros基因结构特征及其在抗病原感染中的免疫调控机制,本实验采用RT-PCR和RACE等方法克隆了尼罗罗非鱼Ikaros基因组DNA序列及其cDNA序列,通过荧光定量PCR分析了Ikaros的组织分布及其对无乳链球菌感染的响应.结果 表明,尼罗罗非鱼Ikaros基因组DNA为20454bp,其包括7