多重荧光实时PCR快速同时检测5种腹泻病毒

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目的病毒性腹泻在世界范围内是引起婴幼儿腹泻和死亡的一个主要原因,因此,快速诊断腹泻病毒对儿童病毒性腹泻的预防和治疗具有重要意义。方法本文利用多重荧光PCR技术建立了一种同时检测5种肠道病毒的方法,包括诺如病毒I型和II型、扎如病毒、轮状病毒、肠道腺病毒和星状病毒。结果本文所建立的一管内检测5种病毒的多重荧光PCR体系和寄生虫、常见致病菌无交叉荧光信号产生,最低检出限可达10拷贝/μL。本研究共收集812份临床样本进行多重荧光PCR方法检测,并以单色荧光PCR为对照。812份标本中,372份标本为5种腹泻病毒阳性,5种病毒的阳性率分别是诺如病毒II型24.9%、轮状病毒15.5%、肠道腺病毒2.8%、星状病毒1.1%、诺如病毒I型0.98%、扎如病毒0.49%,29份样本为混合感染2种病毒。与单色荧光PCR相比,多重荧光PCR灵敏度高于75%,特异性大于99%,Kappa值大于0.75,表明一致性良好。结论本文建立的一管检测5种肠道病毒的方法灵敏度高、特异性强,省时省力,能够满足病毒性胃肠炎的筛查和诊断。
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