甘蔗SoDREB2基因克隆、表达及其转化烟草研究

来源 :2015全国植物生物学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jijididixia
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  DREB 类(dehydration responsive elerment binding protein)转录因子是一个干旱应答元件结合蛋白,可同时调控多个逆境基因的表达,调节植物抗逆的生理生化反应,使植物农艺性状得到综合改良,是植物中重要的转录因子。根据高粱、玉米等与甘蔗同源性较高的植物DREB2 基因的保守区设计引物,采用RACE PCR技术,从甘蔗cDNA 文库中克隆得到甘蔗DREB2 基因cDNA 全长1310bp,编码262 个氨基酸序列。荧光定量检测到DREB2 基因在叶中表达量最大,茎中次之,根最少;聚乙二醇(15%PEG 6000)、NaCl、低温(4℃)和ABA 四种外源胁迫均诱导该基因的表达,其中受干旱诱导最强烈,高盐次之,低温较小,ABA 的最小。分别构建SoDREB2 正义表达载体pBIDREB2(+)、反义表达载体pBIDREB2(-)。通过农杆菌介导法,分别导入烟草k346,获得转基因烟草。对苗期转基因烟草进行干旱处理,检测脯氨酸、丙二醛含量和SOD、POD 和CAT 酶活性,综合抗旱性评价均表现为正义转基因烟草>对照野生型烟草>反义转基因烟草。证明转甘蔗SoDREB2 基因的功能表达与提高烟草抗旱性相关。
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