OLP循环外泌体生物功能研究及microRNAs的差异筛选

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目的:本研究旨在探讨循环外泌体对口腔扁平苔藓T细胞介导的免疫炎症反应的影响并筛选差异表达miRNAs。方法:TEM、NTA及流式细胞术鉴定提取的循环外泌体。外泌体与T细胞共培养12、24、48 h后共聚焦显微镜下观察T细胞对外泌体的摄取,检测共培养后T细胞增殖、凋亡、迁移和炎性因子分泌情况。通过炎症反应和自身免疫相关miScript?miRNA PCR Array微阵列及qPCR筛选外泌体中差异表达miRNAs。最后,对差异表达miRNAs和RAE计分进行相关性分析。结果:提取的外泌体在电镜下呈典型的杯状结构,粒径范围在100nm左右。流式细胞术检测外泌体标志蛋白CD9和CD63。T细胞对PKH-67标记的外泌体的摄取呈时间依赖性。OLP来源循环外泌体与T细胞共培养后促进T细胞增殖、迁移,并降低T细胞凋亡。微阵列及RT-PCR结果显示OLP来源循环外泌体内miR-34a-5p和miR-130b-3p表达升高,miR-301b-3p表达降低。外泌体miR-34a-5p与OLP严重程度正相关。结论:循环外泌体影响OLP中T细胞介导的免疫炎症反应。而且,循环外泌体内miR-34a-5p可以作为评估OLP疾病程度的潜在标志物。
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