【摘 要】
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非肌肉肌球蛋白重链Ⅱ型A(NMHC-ⅡA)介导了PRRSV病毒感染宿主细胞,但是在这一进程中病毒及宿主细胞对于NMHC-ⅡA的调控机制尚不清楚。为探索PRRSV感染宿主细胞过程中调控
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非肌肉肌球蛋白重链Ⅱ型A(NMHC-ⅡA)介导了PRRSV病毒感染宿主细胞,但是在这一进程中病毒及宿主细胞对于NMHC-ⅡA的调控机制尚不清楚。为探索PRRSV感染宿主细胞过程中调控NMHC-ⅡA表达的microRNA,并阐明其对于PRRSV感染的影响。本研究利用生物信息学预测了调控NMHC-ⅡA的miRNAs,通过双荧光素酶报告系统筛选了靶向NMHC-ⅡA 3UTR的miRNAs,发现NMHC-ⅡA能够被let-7f所调控,并分析了let-7f调控NMHC-ⅡA表达的结合位点并进行验证。随后将let-7f模拟物转染PAM细胞发现外源性表达let-7f可以抑制NMHC-ⅡA mRNA和蛋白水平的表达。利用小RNA深度测序及qRT-PCR等方法,检测了在PRRSV感染过程中let-7f与NMHC-ⅡA的表达变化。实验同时验证了对于宿主细胞转染let-7f模拟物可以有效的抑制不同毒株PRRSV的感染。研究验证了let-7f能够靶向宿主细胞的NMHC-ⅡA基因从而负调控PRRSV的感染,揭示了PRRSV可以利用宿主的microRNA调节宿主基因的表达,进而调控病毒复制和增殖,同时过表达let-7f模拟物可以抑制NMHC-ⅡA基因的表达而发挥抗病毒作用。这为我们深入了解PRRSV感染时病毒与宿主的相互作用以及对于病毒的防控提供了全新的视角和策略。
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