苯丙氨酸基因工程菌的选育与发酵*

来源 :第二届全国发酵工程学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wqfzqgkvbavba
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使用射线(<60>Co)、紫外线(UV),亚硝基胍(NTG)交替诱变处理短杆菌,定向筛选而获得苯丙氨酸产生菌株。以此为受体菌,用穿梭质粒进行接合转移的方式,将苯丙氨酸合成有关的外源基因导入这些受体菌中,构建基因工程菌。经过再诱变处理后,获得几株遗传特性较稳定产酸水平高的工程菌株。工程菌株对多种芳香族氨基酸结构类似物有耐受性,可在含有萘啶酮酸和卡那霉素的培养基上生长。对其中编号为FD8511的基因工程菌株进行了发酵条件研究。运用正交试验设计方法确定了菌种生长条件、培养基配方和发酵工艺条件。进行了摇瓶发酵和小罐发酵。该菌株在5升罐中发酵5批苯丙氨酸产量平均为23.8g/L,糖酸转化率为16.5℅。对菌株的发酵产物进行纸层析和氨基酸自动分析仪检测,表明发酵液的主要产物是L-苯丙氨酸,其它氨基酸含量很少,种类也很少。研究结果还表明,在有选择压力存在的条件下连续传代10余次,菌种的产酸率保持稳定。
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