鸭鹅脑炎—卵巢炎综合征病毒的研究

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第一次全国鸭病防控高级研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:w5130293253
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为弄清2010年4月以来采食量锐减、表现神经症状和产蛋率、孵化率大幅降低发病鸭、鹅的发病原因,研究致病病原的生物学特性。本研究对发病鸭、鹅的临床症状、病理变化、发病日龄和死亡率进行了调查。从采集的发病鸭、鹅病料中进行病原分离,采用DNase—SISPA方法对病原进行鉴定,测定病原的基因序列,对分离到的病原进行部分生物学特性的研究。调查发现,2010年4月开始,中国东部、南部各省(市、区)水禽相继发生了一种新的疫病,发病动物包括种鸭、蛋鸭、肉鸭和种鹅、肉鹅。该病临床主要表现为采食量及产蛋率大幅下降甚至绝食、停产,部分出现腿瘫、摇头等神经症状,死亡率为5%-55%。死亡禽和胚体肌肉和卵泡出血,与病鸭、病鹅接触的鸡未见发病。采用敏感鸭胚从发病肉鹅、种鹅、肉鸭和种鸭均分离到病毒,采用DNase—SISPA方法,按照RNA病毒途径得到肉鹅分离株JS804的S1、S2和S3三个基冈相关片段,S1和S3与坦布苏病毒E基因的同源性分别为96%和93%,S2与坦布苏病毒NS5基因同源性为88%。设计1对特异性引物,扩增出JS804毒株E基因985bp片段,登录号为JF302663;在此基础上,参考Bagaza病毒和Rocio病毒的全基因组序列,设计了10对重叠引物扩增出JS804毒株全基因组序列,登录号为JF895923,基因组全长10,916个核苷酸,只包含一个10,278bp的阅读框,编码3425个氨基酸。构建了JS804毒株E基因的原核表达质粒,表达的融合蛋白大小在70KD左右。诱导后5~6h表达量最高。JS804毒株对2日龄和8日龄樱桃谷鸭的致死率分别为4/9和3/6,病毒粒子大小为45—55nm,病毒感染乳鼠脑组织抗原的血凝价为2(5),病毒可以在鸭胚、鹅胚和SPF鸡胚上繁殖,病毒在Vero细胞的毒价为10(5.884)TCID(50),建立了病原的RT—PCR和间接免疫荧光检测方法。
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