【摘 要】
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类胡萝卜素是一类重要的食品添加剂和营养增补剂,虹酵母可作为生产天然类胡萝卜素的优良菌株,提高其单位菌体的类胡萝卜素产量有助于提升其应用价值及开发前景.本研究以
【机 构】
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大连工业大学食品学院 辽宁大连116034
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类胡萝卜素是一类重要的食品添加剂和营养增补剂,虹酵母可作为生产天然类胡萝卜素的优良菌株,提高其单位菌体的类胡萝卜素产量有助于提升其应用价值及开发前景.本研究以圆红冬孢酵母NP11为模式菌株,利用反向代谢工程研究类胡萝卜素途径的代谢调控.首先,利用农杆菌介导转化方法(ATMT)构建突变文库,挑选得到三株颜色各异的突变株,颜色分别为橙色,白色,深红色.随后,对这些菌株进行发酵实验,测定其生物量及类胡萝卜素含量,结果表明,T-DNA插入可在对菌株生长影响不大的情况下,使其类胡萝卜素含量产生明显差异,突变株含量分别为野生型菌株的0.64至1.2倍.而后,采用HPLC-MS对各菌株的类胡萝卜素成分进行了分析,并结合染色体步移技术寻找到T-DNA插入位点,对类胡萝卜素含量及成分变化规律进行了解释.本研究采用反向代谢工程对红酵母的类胡萝卜素代谢调控途径进行了改造,所获得的位点丰富了类胡萝卜素合成途径调节机制的认识,也为进一步的基因操作提供了靶向位点.
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