蛋白磷酸化调控人UGT1A3活性研究

来源 :第十届全国药物和化学异物代谢学术会议暨第三届国际ISSX/CSSX联合学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxxsdc
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  目的 探究蛋白磷酸化修饰对人尿苷二磷酸葡醛酸转移酶UGT1A3的影响。方法 将不同浓度的蛋白激酶抑制剂(姜黄素和钙感光蛋白C(calphostin C))分别与LS174T细胞或重组表达人UGT1A3的Sf9细胞共孵育1小时后,采用RT-PCR和westem blot分别测定LS174T细胞中UGT1A及Sf9细胞中人UGT1A3的表达变化,采用体外孵育黄酮类化合物的方法测定LS174T细胞中UGT1A和Sf9细胞中人UGT1A3催化活性的变化。结果 姜黄素和钙感光蛋白C既不影响LS174T细胞中UGT1A的表达也不影响Sf9中重组UGT1A3的表达,但均浓度依赖性抑制LS174T中UGT1A和Sf9中重组人UGT1A3的葡醛酸转移活性。结论 人UGT1A3受磷酸化修饰调控,其活性随磷酸化程度下降而降低。
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