【摘 要】
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肝素是由重复的二糖单元构成的高分子化合物,含有普遍的修饰性硫酸基团.肝素的临床使用历史长达近百年,是主要的抗凝血药物.长期以来,人们主要以猪小肠粘膜为原料提取以及纯
【机 构】
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合肥工业大学生物与食品工程学院,230009
【出 处】
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2015中国酶工程与糖生物工程学术研讨会
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肝素是由重复的二糖单元构成的高分子化合物,含有普遍的修饰性硫酸基团.肝素的临床使用历史长达近百年,是主要的抗凝血药物.长期以来,人们主要以猪小肠粘膜为原料提取以及纯化肝素.自从2008年出现肝素的大范围污染事件以来,肝素的生物合成研究得以快速发展.大肠杆菌K5荚膜多糖是酶法合成肝素的起始碳骨架.大肠杆菌Nissle 1917有K5荚膜多糖生物合成的全部基因.在本研究中,我们发现大肠杆菌Nissle 1917荚膜多糖的生物合成受不同碳源调控,葡萄糖抑制K5荚膜多糖的生物合成,而添加果糖或甘露糖促进K5荚膜多糖的产生.通过基因敲除及DNA-蛋白相互作用等实验,证明了cAMP-CRP复合物结合在kpsM启动子区域的上游一保守位点,刺激CPS基因簇的转录.CRP结合位点的定点突变消除了刺激效应.通过NMR定量分析表明:与葡萄糖相比,当果糖或甘露糖为唯一碳源时, K5荚膜多糖产量增加了1.5倍.
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