人精子发生相关基因精子表达谱系的建立及初步临床应用

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近年来的研究不仅证实精子中存在mRNA,而且其种类及数量均有一定的复杂性。但目前所有的精子基因表达谱系或者并非精子功能特异的,或者来自于动物而非人类。也就是说,这些谱系无法全面反映人类与精子发生及精子功能相关的事件。而且,有关精子中基因表达的高低与精子功能的关系也未见相关报导。为了研究这些问题,我们首先将从人精子中提取的RNA反转录为cDNA,并用放射性同位素标记,将其与本实验室制备的人睾丸cDNA芯片进行杂交以获得生殖细胞特异的基因表达谱系:其次,我们运用实时荧光定量PCR对芯片杂交的结果进行验证并对本实验建立的精子基因表达谱系中的部分与精子运动相关的基因进行了定量检测。通过对人精子cDNA与睾丸cDNA芯片杂交结果的数据分析后得出,在本实验室已确认的265个成人睾丸高表达的基因中,150个在精子中有表达。进一步对这些基因所编码的蛋白质的功能进行分析后发现,这些基因大多与精子发生或精子功能相关。从而建立了与精子发生相关的人精子基因表达谱系。通过对本谱系中5个与精子运动相关的基因在正常人(n=29)及精子运动低下(n=24)男性精子标本中表达情况的定量检测发现,5个基因中有两个在两组人群中有显著性差异(P<0.05),其在正常人组中的表达水平高于精子运动低下的男性。以上结果说明,本实验所建立的人精子基因表达谱系可用于研究精子发生的分子机制,并为将精子mRNA的检测发展为可反映精子功能及质量的一种非侵入性分子诊断平台提出了可能性。
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