目的:通过体外实验探讨KOA的发病机理及苍膝通痹胶囊的作用机制,阐明KOA的发病与p38MAPK信号通路的相关性及苍膝通痹胶囊能否靶向抑制p38MAPK信号通路保护关节软骨。方法:两步酶消化法分离提取1周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色法及II型胶原免疫组化法进行鉴定,培养至第2代,CCK-8法筛选苍膝通痹胶囊的最佳干预浓度,将软骨细胞分为六组,空白组(KB)、模型组(MX)、DMSO组(DM)、苍膝通痹胶囊组(CX)、p38MAPK信号通路阻断剂SB203580组(SB)、苍膝通痹胶囊+SB203580共培养组(CS),以10ng/ml IL-1β诱导24h建立退变软骨细胞模型,并给于相应的药物培养24h。流式细胞技术检测细胞凋亡率,ELISA法检测上清液中炎性因子IL-1β、TNF-α的含量,Western Blot法检测p38、p-p38、MMP13、CollagenⅡ表达水平,qRT-PCR法检测p38 mRNA、MMP13 mRNA、CollagenⅡmRNA表达。结果:10ng/ml IL-1β可以上调IL-1β、TNF-α、p38、p-p38、MMP13表达,同时下调CollagenⅡ表达(P<0.05),显著诱导软骨细胞退变;苍膝通痹胶囊最佳干预浓度为100μg/ml,且可以明显抑制退变关节软骨细胞凋亡,下调IL-1β、TNF-α、p38、p-p38、MMP13表达的同时上调CollagenⅡ表达(P<0.05),与SB203580作用途径相似,但作用效果低于SB203580(P<0.05)。结论:p38MAPK信号通路在KOA病理进展中的发挥着重要的调节作用,是KOA防治的重要靶点;苍膝通痹胶囊可以靶向阻断p38MAPK信号通路来促进退变软骨细胞的修复,保护关节软骨细胞。