超声/近红外荧光淋巴结靶向双功能造影剂在前哨淋巴结显像中的应用研究

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目的制备一种同时可以超声造影和近红外荧光成像的对淋巴结靶向的造影剂,并通过动物实验评估其对于前哨淋巴结定位以及定性的能力。方法通过声振空化法制备造影剂,对其基本特性进行表征;在VX2肿瘤模型兔的肿瘤周围皮下注射造影剂,同时行超声淋巴造影和近红外荧光成像;经兔耳缘静脉注射超声造影剂SonoVue行淋巴结的血池造影;之后通过蓝染料解剖法切除所有前哨淋巴结并进行病理检查。结果所得造影剂的粒径大小范围2~5μm,荧光染料位于微泡的壳层;造影剂的荧光发射光谱峰值为788 nm;染料的载药量为0.25%,包封率为52.6%。动物实验解剖一共得到淋巴结38枚,活性蓝染料、超声淋巴造影和近红外荧光成像的检出率分别为:94.7%、78.9%和94.7%,敏感性分别为:86.8%、73.7%和92.1%。以病理检测方法为金标准,二维超声诊断前哨淋巴结转移的敏感性为60%,特异性为74.2%,假阴性率为40%,假阳性率为25.8%,受试者工作特征曲线下面积为0.671;超声淋巴造影对于诊断SLN转移的敏感性为80%,特异性为87.1%,假阴性率为20%,假阳性率为12.9%,受试者工作特征曲线下面积为0.835。结论双功能造影剂将两种显像方法取长补短,显著提高了检测前哨淋巴结的检出率和敏感性。利用淋巴靶向的超声造影剂行静脉和血池双重造影,也具有一定的诊断淋巴结良恶性的能力。讨论已有研究表明对于早期浸润性乳腺癌,只切除肿瘤及前哨淋巴结的乳腺癌患者和采取传统术式(肿瘤切除加广泛淋巴结清扫)的患者,其术后5年生存率并没有明显差异。因此如果能够准确地在术前评估前哨淋巴结状态,那么患者就有可能免于接受二次手术的治疗。本研究所制备的造影剂的成膜材料内含有嗜网状内皮组织的脂类物质,经皮下注射后由局部淋巴管进入淋巴结,可被正常淋巴结内的巨噬细胞吞噬从而实现特异性的增强效果,因此正常淋巴结表现为完全充盈状态;反之当正常淋巴结的结构被肿瘤细胞所占居时,局部则因为缺乏巨噬细胞不能吞噬造影剂,从而表现为各种程度的充盈缺损,甚至完全不显影,利用这一特点可以鉴别淋巴结的良恶性。然而,鳞状细胞癌转移的淋巴结内部也可以发生坏死,同样表现为造影时的充盈缺损,因此为了鉴别坏死区域和肿瘤组织,我们通过血池造影观察上述充盈缺损区内是否存在血流灌注,从而证实局部为富血供的肿瘤组织。研究结果显示前哨淋巴结转移的常规二维声像图特征缺乏特异性,而使用超声淋巴造影联合血池造影的双重显像法则可以明显提高诊断的敏感性和特异性,同时降低假阳性率和假阴性率。
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