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目的:分析先天性甲状腺功能减低大鼠海马组织及海马神经元中EphA5启动子甲基化与EphA5基因表达之间的关系,揭示先天性甲减大鼠海马中EphA5基因的调控机制。方法:1.建立先天性甲减大鼠模型,培养原代胎鼠海马神经元。2.取分娩日(Postnaal day,PD)第7天即P7天的甲减组及对照组大鼠海马组织,及培养7d甲减组及对照组的海马神经元作为样本。3.应用BSP克隆测序法检测样本的EphA5启动子CPG岛DNA甲基化水平;应用试剂盒测定样本的DNMT活力。4.取培养7d的甲减组胎鼠海马神经元(包括Azadc组和Hypo-组),检测其EphA5启动子CPG岛DNA甲基化水平,同时应用实时定量RT-PCR技术和Western Blot法分别检测EphA5基因mRNA和蛋白的表达水平。结果:1.先天性甲减大鼠海马组织和原代培养的甲减组海马神经元中,EphA5启动子CPG岛DNA甲基化水平均显著高于对照组(t=10.15,13.74;p<0.001),与EphA5-mRNA表达水平均呈明显负相关(r=-0.957,-0.831;p<0.05)。2.先天性甲减大鼠海马组织和原代培养的甲减组海马神经元中,DNMT活力均显著高于对照组(t=36.01,63.17;p<0.001),与EphA5-mRNA表达水平均呈明显负相关(r=-0.998,-0.831;p<0.05)。3.Azadc组与Hypo-组比较:EphA5基因DNA甲基化水平显著下降(t=7.33,p<0.05),而EphA5基因mRNA和蛋白水平均显著上调(t=7.07,6.42;p<0.05)。结论:DNA甲基化参与了先天性甲减大鼠海马中EphA5表达的调控,去甲基化治疗可上调先天性甲减大鼠海马神经元中EphA5的表达。