分别采用离体与在体研究的方法探究了草鱼脂肪细胞的发育规律。采集草鱼受精卵至出膜30天的鱼体样品,分离腹腔内脏团,苏丹Ⅲ染色观测脂肪组织出现情况;石蜡和冰冻切片后,采用HE染色、油红O和BODIPY荧光染色的方法观察脂肪细胞在腹腔出现的时间及部位;实时定量PCR检测脂质生成基因的时序表达情况;免疫组织化学方法确定PPARγ的表达部位及时间点。另一方面,分离草鱼前体脂肪细胞进行培养,油红O染色提取法观测脂质蓄积情况;酶标法检测3-磷酸甘油脱氢酶(GPDH)酶活性;透射电镜观察细胞分化过程中细胞内显微结构的变化;实时定量PCR检测脂质生成基因的表达情况;同时,检测细胞分化过程中线粒体数量和蛋白的变化。在体研究结果表明,草鱼出膜13天,其肝细胞内开始蓄积脂滴,随后肝胰脏边缘出现脂肪细胞,至16天,已有较多脂肪细胞附着到肠道外壁;脂肪细胞出现初期,未随着发育出现相应的肥大现象;同时,PPARγ和FAS的mRNA表达量在出膜14天后显著升高;免疫组化检测确认,出膜14天至16天的脂肪细胞内呈现PPARγ阳性表达。离体研究结果表明,草鱼前体脂肪细胞在分化过程中,细胞脂质含量逐渐增加,GPDH酶活性显著升高(P<0.05);脂质生成关键基因及线粒体发育相关基因PPARγ、FAS和PGC-1α在分化第3天均显著上调(P<0.05);且细胞分化过程中线粒体数量及蛋白量也显著升高(P<0.05)。研究表明,草鱼脂肪细胞发生于肝胰脏周边,逐渐分布于肠系膜,其发生初期细胞数目不断增加;草鱼前体脂肪细胞分化过程中,胞内脂质含量增加且脂代谢相关基因表达升高,线粒体的数量和蛋白量均显著升高。表明脂肪细胞发育是一个脂质逐步蓄积的过程,可能与胰岛素分泌有关,且需要线粒体提供足够的ATP以合成脂质。该过程受脂质生成基因及线粒体基因的调控。