内生性枯草芽孢杆菌的分离、鉴定及其对芝麻枯萎病的防治效果

来源 :中国植物病理学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:janyang256
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  由尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)引起的芝麻枯萎病为严重影响芝麻生产的土传性病害.为开发防治芝麻枯萎病的生防菌,笔者于2012年夏,从河南省南阳市采集芝麻样品,采用常规组织分离法得到166株内生细菌,经平板对峙和促生试验,筛选到3株对芝麻枯萎病菌F.oxysporum生长有抑制作用的枯草芽孢杆菌(A3-28、A4-2和B5-47).利用细菌16S rDNA通用引物27F和1492R对3株内生菌的DNA进行PCR扩增,得到1 425 ~1 433bp的16S rDNA的片段.菌株A3-28、A4-2和B5-47的16S rDNA序列GenBank登录号分别为KJ000099、KJ008914和KJ000100.用BLAST程序进行同源性分析结果表明,供试3株内生菌的16S rDNA序列与GenBank中多株枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis的相关序列的同源性高达100%.依据菌株的形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析结果,将3株内生菌鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis.为检测内生性枯草芽孢杆菌对芝麻枯萎病的生防效果,将芝麻种子(品种:韩芝1号)播种于蛭石与土壤按1∶1混合的灭菌基质上,待芝麻幼苗长至2叶期后喷施病原菌分生孢子悬浮液(106个/mL),1天后分别喷施枯草芽孢杆菌的NB菌体悬浮液(107 cfu/mL),在接种后7~ 22天观察发病情况.试验结果表明,菌株A3-28、A4-2和B5-47对芝麻枯萎病盆栽防治效果分别为50.12%、46.3%和42.7%.供试3株内生性枯草芽孢杆菌中,菌株A3-28与A4-2对芝麻植株生长有明显促进作用,菌株A3-28有解有机磷和无机磷的活性,而菌株B5-47仅有解有机磷活性.3株生防菌均可在无氮培养基上生长.
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